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专利号: 2023100655515
申请人: 浙江工业大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2026-07-29
缴费截止日期: 暂无
联系人

摘要:

权利要求书:

1.源自Rhodococcus hoagii的L‑泛解酸内酯脱氢酶,氨基酸序列如SEQ IDNO.4所示。

2.一种L‑泛解酸内酯脱氢酶突变体,由SEQ ID NO.4所示氨基酸序列第156位、第224位、第241位、第254位进行单突变或多点联合突变获得。

3.如权利要求1所述的L‑泛解酸内酯脱氢酶突变体,其特征在于所述突变为下列之一或其中两种以上的组合:(1)第156位异亮氨酸突变为亮氨酸;(2)第224位苯丙氨酸突变为组氨酸;(3)第241位缬氨酸突变为异亮氨酸;(4)第254位亮氨酸突变为异亮氨酸。

4.如权利要求1所述的L‑泛解酸内酯脱氢酶突变体,其特征在于所述突变体氨基酸序列如SEQ ID NO.5~7之一所示。

5.编码权利要求1或2所述的L‑泛解酸内酯脱氢酶及突变体的基因。

6.含有权利要求5所述的L‑泛解酸内酯脱氢酶及突变体编码基因的重组载体。

7.含有权利要求5所述的L‑泛解酸内酯脱氢酶及突变体编码基因的基因工程菌。

8.如权利要求7所述的基因工程菌,其特征在于所述基因工程菌为L‑泛解酸内酯脱氢酶或突变体与共轭聚酮还原酶CglCPR和葡萄糖脱氢酶GDH三酶共表达工程菌,按如下方法构建获得:将含有L‑泛解酸内酯脱氢酶或突变体编码基因的pET28b(+)的重组质粒与双连接CglCPR和GDH的重组质粒转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中,筛选双抗性三酶重组共表达工程菌;所述共轭聚酮还原酶基因核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示,所述葡萄糖脱氢酶基因核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。

9.权利要求1或2所述L‑泛解酸内酯脱氢酶及突变体在微生物催化L‑泛解酸内酯制备酮基泛解酸内酯中的应用。

10.权利要求1或2所述L‑泛解酸内酯脱氢酶及突变体在微生物催化制备D‑泛解酸内酯中的应用。