1.禾谷镰刀菌(Fusarium graminearum)AY2‑19,保藏于广东省微生物菌种保藏中心,保藏编号GDMCC No: 63062,保藏日期2022年12月20日,保藏地址:广东省广州市先烈中路
100号大院59号楼5楼。
2.一种权利要求1所述禾谷镰刀菌AY2‑19在提取艾叶总黄酮中的应用。
3.如权利要求2所述的应用,其特征在于,所述应用的方法为:(1)将禾谷镰刀菌AY2‑19孢子接种于产酶培养基中,于30℃、180–200 r/min振荡培养64–72 h,发酵液过滤,收集的滤液为粗酶液;所述产酶培养基终浓度组成为:小麦麸皮40–50 g/L,蛋白胨8–10 g/L,NaNO3 5–6 g/L,KH2PO4 1–2 g/L,MgSO4·7H2O 0.25–0.5 g/L,CaCl2 0.4–0.5 g/L,溶剂为自来水,pH 6.0–6.5;(2)将粗酶液与艾叶粉混合,于26–30℃条件下酶解4–6 h,得艾叶酶解物;(3)往艾叶酶解物中补充去离子水和无水乙醇后,进行超声提取,抽滤,得总黄酮提取液;(4)总黄酮提取液于45℃、–0.1 MPa条件下蒸馏至无液体流出,加入体积为原料艾叶质量计1–2 mL/g的无水乙醇,充分振荡后于8000 r/min离心5–10 min,上清液转入一洁净培养皿中,50℃、–0.1 MPa真空干燥,得总黄酮提取物。
4.如权利要求3所述的应用,其特征在于,所述产酶培养基终浓度组成为:小麦麸皮50 g/L,蛋白胨10 g/L,NaNO3 5 g/L,KH2PO4 2 g/L,MgSO4·7H2O 0.25 g/L,CaCl2 0.5 g/L,溶剂为自来水,pH 6.0。
5.如权利要求3所述的应用,其特征在于,所述禾谷镰刀菌AY2‑19在产酶培养前,先经平板培养基培养产生孢子,然后将孢子悬浮于生理盐水中,获得禾谷镰刀菌AY2‑19孢子液,按体积分数3%–5%的量接入产酶培养基进行培养,所述孢子液制备方法为:将禾谷镰刀菌AY2‑19接种于马铃薯葡萄糖琼脂平板培养基,于28℃培养64–72 h,获得平板培养物;平板培养物中加入无菌生理盐水,用接种环搅动使孢子悬浮,获得禾谷镰刀菌AY2‑19孢子液。
6.如权利要求3所述的应用,其特征在于,步骤(2)所述艾叶粉是新鲜艾叶经自来水洗净后85℃烘干,粉碎后过40目筛的细粉。
7.如权利要求3所述的应用,其特征在于,步骤(2)所述粗酶液体积用量以艾叶粉质量计为4–8 mL/g。
8.如权利要求3所述的应用,其特征在于,步骤(3)所述总黄酮提取液的制备方法为:艾叶酶解结束后,往艾叶酶解物中补充去离子水和无水乙醇,使体系的料液比达到1g:20 mL–
1g:25mL,乙醇体积分数达到50%–60%,搅拌均匀后于水温80–85℃、功率150 W的超声波清洗机中提取30–45 min;超声醇提结束后,趁热抽滤,得总黄酮提取液。