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专利号: 2022116628956
申请人: 佛山大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2026-08-25
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种猪小肠组织外泌体在制备抗猪流行性腹泻病毒药物中的应用,其特征在于,所述猪小肠组织外泌体的分离纯化方法,包括以下步骤:S1:用PBS缓冲液清洗组织,然后取出肠道内容物和粘膜,切成组织片段;

S2:将组织片段浸入含有胶原酶的HBSS缓冲液中,在37℃水浴锅水浴30min,随后置于冰上以结束酶促消化并获得酶解产物;

S3:将酶解产物匀浆后使用40μm过滤器过滤到新鲜管中,然后对滤液进行第一次离心,第一次离心结束后清除细胞碎片,转移上清液并进行第二次离心,第二次离心获得的上清液使用0.22μm PVDF过滤器进行过滤,然后对滤液进行第三次离心;第一次离心的条件为:

1000×g离心10min;第二次离心的温度为4℃,依次进行:2000×g离心20min,5000×g离心

30min,15000×g离心1h;第三次离心的温度为4℃,120000×g离心2h;

S4:第三次离心获得的上清液通过外泌露收集纯化系统进行纯化,得到高纯度外泌体。

2.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述药物剂型为片剂、胶囊、粉剂、丸剂、颗粒剂或者溶液剂。

3.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,步骤S2中,所述胶原酶为Ⅰ型胶原酶,其浓度为300U/mL。