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专利号: 2022115326910
申请人: 浙江工业大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2026-08-19
缴费截止日期: 暂无
联系人

摘要:

权利要求书:

1.一种阿耶波多氏芽孢杆菌在甲酯化(R)‑2,6‑二甲基苯基氨基丙酸制备(R)‑N‑(2,6‑二甲基苯基)氨基丙酸甲酯中的应用,其特征在于,所述应用为:以阿耶波多氏芽孢杆菌经发酵培养获得的湿菌体经冷冻干燥后的干菌体为催化剂,以(R)‑2,6‑二甲基苯基氨基丙酸和无水甲醇为底物,叔丁醇和水为溶剂,在25‑40℃、100‑200rpm条件下反应10‑24h,反应液分离纯化,得到(R)‑N‑(2,6‑二甲基苯基)氨基丙酸甲酯;所述阿耶波多氏芽孢杆菌为阿耶波多氏芽孢杆菌(Bacillus aryabhattai)CCTCC NO:M20191099。

2.如权利要求1所述的应用,其特征在于,所述(R)‑2,6‑二甲基苯基氨基丙酸与催化剂质量比为1:0.05‑1;所述无水甲醇体积用量以(R)‑2,6‑二甲基苯基氨基丙酸质量计为1‑

5mL/g。

3.如权利要求1所述的应用,其特征在于,所述水的添加量以(R)‑2,6‑二甲基苯基氨基丙酸质量计为0.1‑1.0mL/g;所述叔丁醇的添加量以(R)‑2,6‑二甲基苯基氨基丙酸质量计为4‑50mL/g。

4.如权利要求1所述的应用,其特征在于,所述冷冻干燥是取湿菌体在‑20℃条件下冷冻,然后通过冷冻干燥机,在冷阱‑80℃,真空度20Pa下冷冻干燥12h,得到干菌体。

5.如权利要求1所述的应用,其特征在于,所述湿菌体按如下方法制备:

(1)斜面培养:将阿耶波多氏芽孢杆菌接种至LB固体培养基,在28℃培养1天,获得斜面菌体;LB固体培养基组成:蛋白胨10g/L,酵母膏5g/L,NaCl10g/L,琼脂20g/L,溶剂为去离子水,pH为7.0;

(2)种子培养:取斜面菌体接种于种子培养基,在28℃、180r/min条件下培养12‑24h,获得种子液;种子培养基组成:蛋白胨25g/L,葡萄糖20g/L,K2HPO41.0g/L,(NH4)2SO4 5g/L,MgSO4 0.25g/L,橄榄油10mL/L,溶剂为水,pH 7.0;

(3)发酵培养:在无菌条件下,取种子液以体积浓度1‑2%的接种量接种于发酵培养基中,在28℃、180r/min条件下培养24h,获得发酵液,取发酵液在12000rpm离心3‑10min,弃上清液,收集湿菌体;发酵培养基组成为:葡萄糖5g/L,蛋白胨20g/L,K2HPO41.0g/L,(NH4)

2SO41g/L,MgSO40.25g/L,溶剂为去离子水,pH7.0。