利索能及
我要发布
收藏
专利号: 2022114734185
申请人: 福建农林大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2025-10-27
缴费截止日期: 暂无
联系人

摘要:

权利要求书:

1.一种具有抗氧化活性和保肝功效的草菇多肽的制备方法,其特征在于,其包括如下步骤:

(1)将草菇干品进行干燥处理后,磨成粉,制得草菇粉,然后将草菇粉溶于蒸馏水中制成草菇溶液,经超声破碎处理后,用预设浓度的NaOH溶液将草菇溶液的pH调至预设值,继而浸提处理预设时长后,再离心处理并取上清液,然后用预设浓度的HCl将上清液pH调至等电点,继而静沉处理,待沉淀析出后,再次离心处理,获得草菇蛋白质沉淀,将沉淀调至中性后进行冷冻干燥制得草菇蛋白粉;

(2)将草菇蛋白粉与蒸馏水按预设比例混合且加热溶解处理,再用预设浓度的NaOH溶液将草菇蛋白溶液pH调至预设值后,加入碱性蛋白酶酶解处理,继而在高温下灭活处理,再经离心处理后,取上清液,继而用预设浓度的HCl将上清液pH调至中性后,对产物冷冻干燥制得草菇多肽粉;

(3)设置过膜压力,料液温度和pH,在回流液流速为预设值时,通过超滤法透析分离出不同体外抗氧化活性的组分,然后将活性最高的组分冻干,制得草菇多肽冻干粉;

(4)采用Sephadex G‑25凝胶层析色谱进行第二次分离纯化;将经步骤(3)处理所得的草菇多肽冻干粉用超纯水配置成预设浓度的溶液,然后将葡聚糖凝胶充分溶胀后,缓慢匀速地注入层析柱中至距柱口处,使之不出现气泡,观察凝胶床的状态至光滑为止;其中,制备的溶液通过微滤膜过滤后,加入平衡后的层析柱中,再通过超纯水在预设流速下洗脱,并于预设检测波长下检测后,分管收集,并测其不同浓度的DPPH自由基清除能力,以实现进一步纯化处理,完成草菇多肽的制备;

其中,步骤(1)包括:将草菇干品放入干燥箱中,60 ℃干燥至恒重,然后磨成粉,制得草菇粉,再将磨好的草菇粉溶于蒸馏水中,经超声破碎30 min后,用 0.1 mol/L 的NaOH溶液将草菇溶液pH调至10.0,再浸提处理1 h,以6000 r/min 速率离心15 min,继而取上清液,再用0.1 mol/L 的HCl将上清液pH调至等电点,然后静沉处理1 h,待沉淀析出后,再次以 

6000 r/min速率离心15 min,得到草菇蛋白质沉淀,将草菇蛋白质沉淀调至中性后进行冷冻干燥制得草菇蛋白粉,置于干燥皿中保存;

步骤(2)包括:将草菇蛋白粉与蒸馏水以1:50的比例45 ℃加热溶解处理50 min,用0.1 mol/L的NaOH溶液将草菇蛋白溶液pH调至11后加入7000 U/g碱性蛋白酶酶解2.5h,继而在

95 ℃的高温下灭活20 min,再以6000 r/min速率离心20 min,取上清液,再用0.1 mol/L的HCl将上清液pH调至中性,冷冻干燥制得草菇多肽粉,置于干燥皿中保存步骤(3)包括:设置过膜压力为1.5~6 bar,料液温度为15~45 ℃,pH为5.0~9.0,在回流液流速为4~8 LMH时,通过超滤法透析分离出不同组分的体外抗氧化活性,将活性最高的组分冻干,制得草菇多肽冻干粉;

步骤(4)包括:采用Sephadex G‑25凝胶层析色谱进行第二次分离纯化,将草菇多肽冻干粉用超纯水配置成浓度为50 mg/mL的溶液,将葡聚糖凝胶充分溶胀后,缓慢匀速地注入层析柱中至距柱口处,使之不出现气泡,观察凝胶床的状态至光滑为止;其中,制备的溶液过0.22 μm 微滤膜,加入平衡后的层析柱中;再通过超纯水洗脱,其流速为1 mL/min,最后置于波长254nm下检测,再分管收集,并测其不同浓度的DPPH自由基清除能力,实现进一步纯化处理,完成草菇多肽的制备。

2.如权利要求1所述的具有抗氧化活性和保肝功效的草菇多肽的制备方法,其特征在于,步骤(3)中,设置过膜压力为1.5 bar,料液温度为25 ℃。

3.如权利要求1所述的具有抗氧化活性和保肝功效的草菇多肽的制备方法,其特征在于,步骤(3)中,设置pH为7.0,回流液流速为6 LMH。

4.根据权利要求1至3任一项所述的制备方法在制备抗氧化及保肝产品中的应用。