1.一种苯佐卡因的比率荧光免疫检测方法，其特征在于，其包括以下步骤：S1.蓝色荧光碳点的合成：将柠檬酸二铵和尿素加入到烧杯中并加入超纯水溶解，溶解后转移至高压反应釜中加热反应；反应完成后待冷却至室温取出，过滤后将滤液用超纯水透析，得到蓝色荧光碳点水溶液；

S2.微孔板的包被：将苯佐卡因包被原加入微孔板中，在冰箱静置一段时间，随后洗去包被液；将微孔板拍干，加入封闭液，温育一段时间后，将微孔板拍干，烘干，备用；

S3.标准曲线的建立：将不同浓度的苯佐卡因标准溶液与抗体同时加入步骤S2得到的微孔板中，温育一定时间后，洗板，加入碱性磷酸酶标记的羊抗鼠二抗，温育一段时间后洗板，加入L‑抗坏血酸‑2‑磷酸三钠盐溶液温育，随后加入步骤S1制备的蓝色荧光碳点水溶液和多巴胺溶液，温育；在350nm激发下，记录380～600nm范围内的荧光发射光谱，随后在

430nm激发下，记录460~700nm范围内的荧光发射光谱，计算荧光强度比值F460/F510，以苯佐卡因浓度为横坐标，F460/F510为纵坐标绘制标准曲线；

S4.样品中苯佐卡因浓度的测定：将等体积处理好的样品替代苯佐卡因标准品溶液，按照步骤S3的步骤操作，将测到的F460/F510代入所述步骤S3得到的标准曲线，以得到样品中苯佐卡因浓度；

‑1

所述步骤S3中抗体的浓度为1～5μg L ，时间为30～40min；

所述步骤S3中L‑抗坏血酸‑2‑磷酸三钠盐浓度为0.1～1mM，时间为30～40min；

所述步骤S3中多巴胺浓度为5～10mM；

所述步骤S3中，加入步骤S1制备的蓝色荧光碳点水溶液和多巴胺溶液，温育30～

40min。

2.根据权利要求1所述苯佐卡因的比率荧光免疫检测方法，其特征在于，所述步骤S1中柠檬酸二铵和尿素的质量比为3：4。

3.根据权利要求1所述苯佐卡因的比率荧光免疫检测方法，其特征在于，所述步骤S1中加热反应的加热温度为180℃，保温6～8h。

4.根据权利要求1所述苯佐卡因的比率荧光免疫检测方法，其特征在于，所述步骤S1中蓝色荧光碳点使用时稀释倍数为50～100倍。

5.根据权利要求1所述苯佐卡因的比率荧光免疫检测方法，其特征在于，所述步骤S2中苯佐卡因包被原体积100μL，静置12～15h。

6.根据权利要求1所述苯佐卡因的比率荧光免疫检测方法，其特征在于，所述步骤S2中封闭液加入量为100～200μL，封闭1～3h。