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专利号: 2022111409350
申请人: 浙江工业大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2026-07-29
缴费截止日期: 暂无
联系人

摘要:

权利要求书:

1.一种UPLC同时检测柑橘中10种呋喃香豆素的方法,其特征在于:同时检测方法包括如下步骤:S1:配制标准品:称取10种呋喃香豆素的标准品,分别置于容量瓶中,加入甲醇溶液溶解稀释定容,获得单一标准储备液;所述S1中的10种呋喃香豆素成份的标准品的重量称取

5mg,所述容量瓶体积采用10mL;

所述10种呋喃香豆素具体为花椒毒内酯、佛手酚、异茴芹内酯、环氧佛手柑素、佛手柑素、欧前胡素、异欧前胡素、补骨脂素、佛手柑内酯、异补骨脂素;

S2:配制标准溶液:分别移取S1中的单一标准储备液,加入甲醇溶液稀释配制成混合标准溶液;所述S2的混合标准溶液的浓度为50μg/ml;

S3:样品前处理:准确称取柑橘样品2g,置于50mL的离心管中,加入甲醇15mL,浸泡提取

30min,100rpm、30℃水浴震荡辅助提取30min,4000rpm离心10min,收集上清液,向残留物中再加入甲醇10mL,水浴震荡辅助提取30min, 4000rpm离心10min,收集上清液,重复两次,合并上清液;所述合并上清液在35℃真空旋转蒸发仪上旋转蒸发至无醇,用色谱级甲醇定容于5mL,经0.22μm的尼龙滤膜过滤后待检测;

S4:检测分析:将步骤S2的混合标准溶液和步骤S3的待测样品分别上超高效液相色谱仪进行定性和定量分析测定,得到混合标准溶液的标准工作曲线和柑橘样品中呋喃香豆素的种类及含量;

所述S4的标准工作曲线由步骤S2的混合标准溶液移取5μL、10μL、25μL、50μL、75μL及

100μL分别置于50mL的离心管中,不加入样品并根据S3处理后上机测定得到;

所述S4的超高效液相色谱仪的测试条件如下:色谱柱:Waters CORTECS C18+柱,3.0mm×150mm,1.6μm;柱温:30°C;流速:0.3mL/min;进样量:5μL;检测波长:310nm;流动相A:0.1%甲酸‑水;流动相B:0.1%甲酸‑乙腈;采用梯度洗脱;

所述梯度洗脱的程序:

0 3.00min,流动相B的体积分数5%至15%;

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3.00 8.00min,流动相B的体积分数由15%至21%;

~

8.00 16.00min,流动相B的体积分数为21%;

~

16.00 29.00min,流动相B的体积分数由21%至30%;

~

29.00 42.00min,流动相B的体积分数由30%至42%;

~

42.00 50.00min,流动相B的体积分数由42%至60%;

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50.00 59.00min,流动相B的体积分数由60%至95%;

~

59.00 59.10min,流动相B的体积分数由95%至5%;

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59.10 62.00min,流动相B的体积分数为5%。

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