1.一种检测链格孢菌引起烟草赤星病的试剂盒，其特征在于，包括：用于识别链格孢菌的ITS种属特异序列的HP1，以及lambda外切酶、探针P1、分子信标MB；

所述链格孢菌的ITS种属特异序列为SEQ ID NO：1；

所述HP1的核苷酸序列为SEQ ID NO：2；

所述P1的核苷酸序列为SEQ ID NO：3；

所述MB的核苷酸序列为SEQ ID NO：4。

2.根据权利要求1所述的一种检测链格孢菌引起烟草赤星病的试剂盒，其特征在于，所述HP1的5'端修饰有磷酸基团。

3.根据权利要求1所述的一种检测链格孢菌引起的烟草赤星病的试剂盒，其特征在于，所述MB的5'‑端修饰有FAM，3'‑端修饰有BHQ‑1。

4.根据权利要求1所述的一种检测链格孢菌引起的烟草赤星病的试剂盒，其特征在于，所述HP1的浓度为1.0μM，lambda外切酶加入量为1U，P1的浓度为0.6μM～1.8μM，MB的浓度为

1μM。

5.一种检测链格孢菌引起的烟草赤星病的方法，其特征在于，提取链格孢菌基因组，将链格孢菌基因组中的ITS种属特异性序列与HP1进行杂交，获得杂交链，用lambda外切酶依

2+

次去除杂交链中HP1的5'‑磷酸化端核苷酸，释放出部分Mg 依赖的脱氧核酶序列，再与P1杂

2+ 2+ 2+

交，组装形成完整的Mg 依赖的脱氧核酶，在Mg 存在的情况下，完整的Mg 依赖的脱氧核酶识别并剪切含核糖核酸的底物分子信标MB，释放荧光基团，出现明显的荧光信号，经荧光分光光度计检测即可。

6.根据权利要求5所述的一种检测链格孢菌引起的烟草赤星病的方法，其特征在于，包括以下步骤：S1、基因组的提取：

从受链格孢菌侵染的烟草植株中提取链格孢菌的基因组；

S2、材料准备：

取用于识别链格孢菌的ITS种属特异序列的HP1，以及lambda外切酶、探针P1、分子信标MB、反应液，备用；

S3、检测：

S3‑1、初次杂交：

将链格孢菌的基因组与HP1加入反应液中，所述链格孢菌基因组浓度为10pg/L‑100pg/L，链格孢菌的基因组中的ITS种属特异序列与HP1进行杂交反应，反应时间为20min，获得杂交产物；

S3‑2、外切：

向S3‑1的反应体系中加入lambda外切酶，lambda外切酶与杂交产物进行外切反应，反应时间为20min，获得反应产物；

S3‑3、二次杂交：

向S3‑2的反应体系中加入P1，P1与所述反应产物进行杂交反应，反应时间为40miin，获

2+

得完整的Mg 依赖的核酶；

S3‑4、三次杂交：

2+

继续向S3‑3的反应体系中加入MB，MB的rA位点被所述Mg 依赖的脱氧核酶切割，MB中的

2+

荧光‑淬灭基团发生分离，出现荧光信号；所述Mg 依赖的脱氧核酶不断识别剪切MB，使荧光信号增强。

7.根据权利要求6所述的一种检测链格孢菌引起的烟草赤星病的方法，其特征在于，步骤S1中，从受链格孢菌侵染的烟草植株中提取链格孢菌的基因组的方法为：S1‑1、将受链格孢菌侵染的烟草植株放入研磨袋，加入相对于所述烟草植株2倍质量的缓冲液进行碾磨，所述缓冲液的组成成分为：10mM Tris‑Cl、1mM EDTA，缓冲液的pH为8.0；

S1‑2、研磨后的混悬液经沸水浴加热10min，再经冰水冷却后涡旋1min，使链格孢菌基因组将从其细胞壁内释放出来；

S1‑3、将涡旋后的混悬液离心，取上清液1μL，以快速定量检测链格孢菌基因组。

8.根据权利要求6所述的一种检测链格孢菌引起的烟草赤星病的方法，其特征在于，所述S3‑1、S3‑2、S3‑3、S3‑4中，反应条件均为：37℃；

所述S3‑1、S3‑3、S3‑4中，在反应开始前，先将待反应体系置于95℃孵育1min。

9.根据权利要求6所述的一种检测链格孢菌引起的烟草赤星病的方法，其特征在于，步骤S3‑1中，所述反应液为：1×lambda exonuclease反应缓冲液，所述lambda exonuclease反应缓冲液的组成为：67mM Glycine‑KOH、2.5mM MgCl2、0.01％TritonX‑100，反应缓冲液在25℃时的pH为9.4。

10.根据权利要求6所述的一种检测链格孢菌引起的烟草赤星病的方法，其特征在于，

2+

步骤S3‑4中，所述Mg 的终浓度为20mM，所述缓冲溶液的组成成分为：25mM HEPES、100mM NaCl，缓冲溶液的pH 7.0。