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专利号: 2022110371055
申请人: 浙江工业大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2026-10-14
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种环缩肽类化合物的制备方法,其特征在于,所述方法按如下步骤进行:

(1)菌株发酵:将尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)CGMCC No.17763接至GPY培养基,在室温下避光静置发酵10‑30天,获得发酵混合物;所述GPY培养基组成:葡萄糖10g/L,蛋白胨5g/L,酵母提取物2g/L,L‑色氨酸2g/L,海盐2g/L,溶剂为水,pH 7.5;

(2)化合物提取:将步骤(1)制备的发酵混合物离心,取沉淀加入甲醇a后进行超声辅助萃取,有机层减压浓缩至无液体流出,得到粗提物浸膏;将全部粗提物浸膏用甲醇b溶解后用0.22μm有机滤头进行过滤,滤液选用高效液相色谱分析型色谱柱进行等度洗脱,流动相为体积比70:30的乙腈与水,收集第16min的流出液,去溶剂,干燥,获得所述式(I)所示环缩肽类化合物;

2.如权利要求1所述环缩肽类化合物的制备方法,其特征在于,步骤(1)所述尖孢镰刀菌CGMCC No.17763发酵前先活化,种子扩大培养,再将种子液以50mL/L的接种量接种至GPY培养基;所述活化和种子扩大培养按如下步骤进行:①活化培养:将尖孢镰刀菌CGMCC No.17763接入PDA斜面培养基,28℃培养箱培养3‑4天,活化菌种;PDA斜面培养基终浓度组成为:葡萄糖20g/L,马铃薯200g/L,琼脂15‑18g/L,溶剂为蒸馏水,pH自然;②种子培养:从步骤①活化菌落中挑取一接种环菌体接种至PDB种子培养基,在200rpm、28℃条件下摇床培养3天,获得种子液;PDB种子培养基终浓度组成为:马铃薯200g/L,葡萄糖20g/L,溶剂为蒸馏水,pH自然。

3.如权利要求1所述环缩肽类化合物的制备方法,其特征在于,步骤(2)所述超声条件为:30‑50kHz超声15‑20min。

4.如权利要求1所述环缩肽类化合物的制备方法,其特征在于,步骤(2)高效液相色谱条件为:液相仪器:UV‑VIS,检测器:岛津SPD‑16;高效液相输液泵:岛津LC‑16P;色谱条件:分析型色谱柱,C18色谱柱4.6×250mm,流速1.0mL/min,柱温40℃,检测波长209nm。