1.一种基于铜离子络合显色反应检测丝素蛋白的比色免疫传感器，其特征在于：包括铜离子显色剂、纳米氧化铜抗体探针分散液和羧基化磁珠免疫探针分散液；其中：所述铜离子显色剂的制备方法包括：将2‑肼吡啶和1,2‑二苯基乙二酮分别溶解于无水乙醇中，随后将含有1,2‑二苯基乙二酮的乙醇溶液缓慢滴加至含有2‑肼吡啶的乙醇溶液中，回流加热反应，反应完成后将所得产物冷却至室温，真空蒸发溶剂，得到重结晶的黄色固体产物铜离子配合物；将Tris‑HCl和四氢呋喃混合作为溶剂，配制得到铜离子显色剂，冷藏保存；

所述纳米氧化铜抗体探针分散液的制备方法包括：取纳米氧化铜颗粒溶解于磷酸盐缓冲液中，室温下超声处理；加入兔抗丝素蛋白血清并摇晃；然后将所得混合物离心处理，去除上清液以去除未与纳米氧化铜颗粒结合的抗体；然后将与丝素蛋白抗体结合的纳米氧化铜颗粒重新分散在磷酸盐缓冲液中，离心，收集上清液，加入抗体封闭液并将摇晃，得到抗体功能化的纳米氧化铜粒子分散液；

所述羧基化磁珠免疫探针分散液的制备方法包括：移取羧基化磁珠到微离心管中，用移液枪将磁珠用含有Tween20的磷酸盐缓冲液清洗，洗涤多次后，将磁珠重悬于磷酸盐缓冲液中，得到磁珠分散体；将1‑乙基‑（3‑二甲基氨基丙基）碳二亚胺盐酸盐和N‑羟基丁二酰亚胺加入到MES缓冲液中，并将其移入磁珠分散体中，孵育；对所得孵育物用含有Tween20的磷酸盐洗涤缓冲液洗涤多次，并在磷酸盐洗涤缓冲液中分散，然后加入鼠抗丝素蛋白抗体，孵育；加入抗体封闭液，并在振荡器上震荡以封闭多余的活性位点；最后用磁分离液和含Tween20的磷酸盐缓冲液清洗多次，将所得羧基化磁珠免疫探针重悬于磷酸盐缓冲液中，得到羧基化磁珠免疫探针分散液，冷藏保存。

2.如权利要求1所述的比色免疫传感器，其特征在于：所述铜离子显色剂的制备方法具体包括：将1.0‑1.2mg的2‑肼吡啶和2.0‑2.2mg的1,2‑二苯基乙二酮分别溶解于18‑22mL无水乙醇中，随后将含有1,2‑二苯基乙二酮的乙醇溶液缓慢滴加至含有2‑肼吡啶的乙醇溶液中，回流加热反应2‑4h，反应完成后将所得产物冷却至室温，真空蒸发溶剂，得到重结晶的黄色固体产物铜离子配合物；将45‑55mM的Tris‑HCl和四氢呋喃按照1:8‑10的体积比混合作为溶剂，配制得到8‑12μM的铜离子显色剂，冷藏保存。

3.如权利要求1所述的比色免疫传感器，其特征在于：所述纳米氧化铜抗体探针分散液的制备方法具体包括：取2‑4mg纳米氧化铜颗粒溶解于1.3‑1.7mL pH=7.4的磷酸盐缓冲液中，室温下超声处理6‑10h；加入180‑220μL兔抗丝素蛋白血清并摇晃5‑6h；然后将所得混合物于高速离心机中以11000‑12000rpm的转速离心15‑25min，去除上清液以去除未与纳米氧化铜颗粒结合的抗体；然后将与丝素蛋白抗体结合的纳米氧化铜颗粒重新分散在1.3‑

1.7mL磷酸盐缓冲液(pH=7.4)中，以800‑1200rpm离心6‑10min，收集上清液，加入250‑350μL抗体封闭液并将摇晃0.5‑1.5h，得到抗体功能化的纳米氧化铜粒子分散液。

4.如权利要求1所述的比色免疫传感器，其特征在于：所述羧基化磁珠免疫探针分散液的制备方法具体包括：移取8‑12μL 45‑55mg/mL的羧基化磁珠到1.3‑1.7mL微离心管中，用移液枪将磁珠用含有0.03‑0.07wt% Tween20的250‑350μL磷酸盐缓冲液清洗，洗涤多次后，将磁珠重悬于250‑350μL pH=7.4的磷酸盐缓冲液中，得到磁珠分散体；

将14.5‑14.7mg1‑乙基‑（3‑二甲基氨基丙基）碳二亚胺盐酸盐和5.3‑5.5mg N‑羟基丁二酰亚胺加入到8‑12mL pH=6.0的MES缓冲液中，并将其移入磁珠分散体中，在35‑39℃下孵育35‑45min；

对所得孵育物用含有0.03‑0.07wt% Tween20的磷酸盐洗涤缓冲液洗涤多次，并在250‑

350μL pH=7.4的磷酸盐洗涤缓冲液中分散，然后加入35‑45μL浓度为0.8‑1.2mg/mL的鼠抗丝素蛋白抗体，在35‑39℃下孵育80‑100min；加入80‑120μL抗体封闭液，并在振荡器上震荡

0.5‑1.5h以封闭多余的活性位点；最后用磁分离液和含0.03‑0.07wt% Tween20的磷酸盐缓冲液清洗多次，将所得羧基化磁珠免疫探针重悬于450‑550μL pH=7.4的磷酸盐缓冲液中，得到羧基化磁珠免疫探针分散液，冷藏保存。

5.一种利用权利要求1‑4之一所述比色免疫传感器定量检测丝素蛋白的方法，其特征在于：

A）标准曲线的建立：将羧基化磁珠免疫探针分散液分别与含有不同浓度丝素蛋白的磷酸盐缓冲液在离心管中混合均匀，孵育活化，磁分离后，用含有Tween‑20的磷酸盐洗涤缓冲溶液重复洗涤多次，除去上清液，加入抗体功能化的氧化纳米铜探针分散液，在振荡器上室温震荡混合反应，得到免疫复合物；随后用含有Tween20的磷酸盐缓冲溶液和Tris‑HCl缓冲液分别洗涤经过震荡混合和磁分离所得到的免疫复合物多次，向清洗后的免疫复合物缓慢滴加盐酸溶液以使纳米氧化铜中的铜离子游离出来，最后向所得混合溶液中加入铜离子显色剂，室温静置后，取上清液进行紫外可见光吸光度检测，获得对应不同浓度丝素蛋白的吸光度，以此数据建立标准曲线；

B）待检物的检测：与步骤A）的区别在于，将待检物替换含有不同浓度丝素蛋白的磷酸盐缓冲液；然后在测得吸光度后，将吸光度数据代入标准曲线中，获得丝素蛋白浓度。

6.如权利要求5所述的方法，其特征在于：所述标准曲线的建立具体包括：将70‑90μL羧基化磁珠免疫探针分散液分别与90‑110μL含有不同浓度丝素蛋白的pH=7.4的磷酸盐缓冲液在离心管中混合均匀，在35‑39℃下孵育活化30‑50min，磁分离后，用含有0.03‑0.07wt% Tween‑20的磷酸盐洗涤缓冲溶液重复洗涤多次，除去上清液，加入150 300μL抗体功能化的~氧化纳米铜探针分散液，在振荡器上室温震荡混合反应8‑12min，得到免疫复合物；随后用含有0.03‑0.07wt% Tween20的磷酸盐缓冲溶液和pH=7.4的Tris‑HCl缓冲液分别洗涤经过震荡混合和磁分离所得到的免疫复合物多次，向清洗后的免疫复合物缓慢滴加20 50μL ~

0.08‑0.12M的盐酸溶液以使纳米氧化铜中的铜离子游离出来，最后向所得混合溶液中加入

150 300μL铜离子显色剂，室温静置3‑7min后，取上清液进行紫外可见光吸光度检测，获得~

对应不同浓度丝素蛋白的吸光度，以此数据建立标准曲线。