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专利号: 2022109386952
申请人: 大连工业大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2025-10-14
缴费截止日期: 暂无
联系人

摘要:

权利要求书:

1.一种从唐古特铁线莲中制备常春藤皂苷C的方法,其特征在于,包括如下步骤:

(1)唐古特铁线莲预处理:唐古特铁线莲叶、唐古特铁线莲花粉碎,用石油醚冷浸,去石油醚部分,获得脱脂后样品;

(2)将步骤(1)所得脱脂后样品,用甲醇‑水或乙醇‑水进行有机溶剂提取,多次提取合并提取液,获得皂苷提取液;

(3)蒸发浓缩步骤(2)获得的皂苷提取液,利用有机溶剂对皂苷提取液进行萃取,多次萃取后合并萃取液,萃取液浓缩、挥干,获得皂苷粗提物;

(4)利用固相萃取技术对皂苷粗提物进行样品预处理,获得含常春藤皂苷C的组分;

所述固相萃取技术包括:将皂苷粗提物配制成5‑100mg/mL的皂苷水溶液,使用30%‑

60%(v/v)的甲醇活化固相萃取柱,使用乙腈‑水或甲醇‑水对固相萃取柱进行淋洗,收集相应组分的淋洗液,浓缩烘干获得含常春藤皂苷C的组分,所述固相萃取柱的填料为C18 HC、C18 ME、C18 Ye或C18 HD;

(5)利用液相色谱分离技术对含有常春藤皂苷C的组分进行制备,即得;

液相色谱柱为HC C18,反相C8或Click PN,色谱柱内径为4.6mm‑20mm,进样量50‑1000μL,流速为1‑15mL/min;检测波长200‑220nm,柱温20℃‑40℃;采用甲醇‑水或乙腈‑水为流动相,其中甲醇或乙腈为有机相,纯水为水相;洗脱条件为:20‑60分钟内,有机相体积浓度由

5%‑10%提升至75%‑95%的梯度洗脱或按照有机相体积浓度20%‑70%等度洗脱;对保留时间10‑40min主要成分为常春藤皂苷C的馏分进行收集。

2.根据权利要求1所述的一种从唐古特铁线莲中制备常春藤皂苷C的方法,其特征在于:步骤(1)所述唐古特铁线莲与石油醚的体积比为2‑5,所述冷浸的时间为12‑24h。

3.根据权利要求1所述的一种从唐古特铁线莲中制备常春藤皂苷C的方法,其特征在于:步骤(2)中的提取方法为超声波辅助提取或加热回流提取;所述超声波辅助提取的条件为:提取时间为20‑100min,温度20‑80℃,脱脂后样品与甲醇‑水或乙醇‑水的比例为1:10‑

1:60(m/v),甲醇‑水中甲醇的浓度为40%‑90%(v/v),乙醇‑水中乙醇的浓度为40%‑90%(v/v),功率50‑100w,提取1‑5次;所述加热回流提取的条件为:提取温度40‑90℃,脱脂后样品与甲醇‑水或乙醇‑水的比例为1:20‑1:60(m/v),提取时间为:20‑100min,提取1‑3次。

4.根据权利要求1所述的一种从唐古特铁线莲中制备常春藤皂苷C的方法,其特征在于:步骤(3)所述有机溶剂为石油醚以及乙酸乙酯、水饱合正丁醇中的一种或两种,萃取1‑5次;首先使用石油醚对皂苷提取液进行萃取,萃取后弃石油醚层,再用乙酸乙酯和/或水饱和正丁醇进行萃取,萃取后合并正丁醇层和/或乙酸乙酯层。

5.根据权利要求1所述的一种从唐古特铁线莲中制备常春藤皂苷C的方法,其特征在于:固相萃取淋洗条件为:乙腈‑水淋洗时:超纯水1BV×1‑5次,乙腈:水=20‑25:75‑80 1BV×1‑5次,乙腈:水=30‑35:65‑701BV×1‑5次,乙腈:水=40‑45:55‑60 1BV×1‑5次,纯乙腈洗脱1BV×1‑5次;甲醇‑水淋洗时:超纯水1BV×1‑5次,甲醇:水=20‑25:75‑80 1BV×1‑5次,甲醇:水=30‑35:65‑70 1BV×1‑5次,甲醇:水=40‑45:55‑60 1BV×1‑5次,甲醇:水=

50‑55:45‑50 1BV×1‑5次,纯甲醇洗脱1BV×1‑5次。