1.一种基于交替光激发调控亚甲基蓝电子传递的电化学传感器的构建方法,其特征在于,步骤如下:(1)将ITO电极在NaOH溶液中加热煮沸一段时间,然后分别在乙醇、水中超声清洗,获得清洗后的ITO电极;
(2)固定520nm具有光吸收的金纳米粒子溶液修饰在步骤(1)清洗后的ITO电极表面,孵育后得到的材料记为AuNPs/ITO;
(3)以AFB1适配体为主链,MB标记的第一条互补DNA和MB与巯基标记的第二条互补DNA进行互补配对,利用多聚酶链式反应技术合成含有三条链的复合物,记为MB‑Mix‑DNA;
(4)将在650nm具有光吸收的MB‑Mix‑DNA修饰在步骤(2)得到的AuNPs/ITO表面,并在一定温度条件下孵育一夜,得到电化学传感器,记为MB‑Mix‑DNA/AuNPs/ITO。
2.根据权利要求1所述的基于交替光激发调控亚甲基蓝电子传递的电化学传感器的构建方法,其特征在于,步骤(1)中,所述ITO电极的直径为6mm,NaOH溶液浓度为0.3M,煮沸的一段时间为30min;在乙醇、水中超声时间均为10~15min。
3.根据权利要求1所述的基于交替光激发调控亚甲基蓝电子传递的电化学传感器的构建方法,其特征在于,步骤(2)中,孵育时间为30min,孵育温度为37℃,金纳米粒子溶液修饰的用量为6~8μL,所述金纳米粒子溶液的浓度为5nM。
4.根据权利要求1所述的基于交替光激发调控亚甲基蓝电子传递的电化学传感器的构建方法,其特征在于,步骤(3)中,所述AFB1适配体、MB‑DNA1、MB‑DNA2的浓度均为3μM;所述利用多聚酶链式反应技术合成含有三条链的复合物的具体条件为:首先在95℃条件下变性
2min,然后在4℃下退火10min。
5.根据权利要求1所述的基于交替光激发调控亚甲基蓝电子传递的电化学传感器的构建方法,其特征在于,步骤(4)中,所述MB‑Mix‑DNA的浓度为1μM;所述修饰的用量为6~8μL。
6.根据权利要求1‑5任一项所述方法制备的传感器用于检测黄曲霉毒素B1的用途,其特征在于,步骤如下:(1)首先配制不同浓度的AFB1溶液,然后在MB‑Mix‑DNA/AuNPs/ITO电化学传感器表面依次修饰一定量且浓度呈梯度变化的AFB1溶液,室温下孵育,用Tris‑HCl溶液对电极进行清洗,得到修饰AFB1的电化学传感器,其中每个浓度的AFB1溶液对应修饰每个电化学传感器;
(2)构建标准曲线:以步骤(1)修饰后的电化学传感器为工作电极,饱和Ag/AgCl电极为参比电极,铂丝电极为对电极,利用外界光源,设定激发波长为λ1和λ2,对电化学传感界面激发,并在激发过程中进行电化学测试,每一个浓度的AFB1修饰的电极对应获得两个的电化学信号,分别记为I1和I 2;根据获得的两个电流值的比值和AFB1浓度的对数关系构建标准曲线;
(3)样品中AFB1的检测:首先获取样品液,修饰一定量的样品液于电化学传感器表面,利用激发波长分别为λ1和λ2的激光器对工作界面激发,在激发过程中通过电化学测试得到I1和I 2;将两者的比值代入步骤(2)构建的标准曲线,即可获知样品中AFB1的浓度;实现未知样品中AFB1检测的用途。
7.根据权利要求6所述的用途,其特征在于,步骤(1)中,所述AFB1溶液的浓度为0.5~‑1
50000pg mL ;所述孵育时间为40~120min;所述电化学传感器表面修饰AFB1溶液的用量为
6μL。
8.根据权利要求6所述的用途,其特征在于,步骤(2)中所述电化学测试由型号为Autolab PGSTAT 302N的电化学工作站记录、检测;所述检测条件为在0.1M、pH=7.4的PBS缓冲溶液中进行测试,扫描电压范围为‑0.4~0V,振幅为0.025V,频率为25Hz。
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9.根据权利要求6所述的用途,其特征在于,步骤(2)中所述外界光源功率为70mW/cm ,λ
1和λ2分别为532nm和650nm,距离工作电极的垂直距离为3cm。
10.根据权利要求6所述的用途,其特征在于,步骤(3)中所述样品液于传感器表面的用2
量为6μL;所述外界光源功率为70mW/cm ,λ1和λ2分别为532nm和650nm,距离工作电极的垂直距离为3cm。