1.乳杆菌在低pH值果汁中微胶囊化包封方法,其特征在于,包括如下操作步骤:(1)果胶制备
取干燥的鲜浆果,提取制备果胶;
(2)菌种活化与悬浮液制备
a活化乳酸菌种;
b将步骤(1)的果胶溶解于0.1%蛋白胨水溶液中,添加适量吐温‑80,充分混匀后得果胶溶液,置于水浴灭菌,冷却,将乳酸菌沉淀物悬浮在果胶溶液中,混匀备用;
(3)微胶囊程序化
将步骤(2)乳酸菌悬浮液使用微胶囊成型装置挤出至3.5%(W/V)的氯化钙溶液中,以
200‑250转/分的速度搅拌;所得微胶囊在室温下与氯化钙溶液接触30‑35min,以确保完全固化;倾析除去氯化钙溶液,过滤回收微胶囊;然后利用无菌0.1%蛋白胨水溶液清洗数次,去除多余钙离子及未包被的细菌;最后,悬浮在Ringer平衡盐溶液中得微胶囊化乳杆菌,备用;
(4)生物膜程序化
在MRS肉汤培养基中添加3.5‑4.5%(W/V)氯化钙溶液,充分灭菌混匀后,将步骤(3)制备好的微胶囊化乳杆菌转移至培养基中,在37℃下连续培养18h;倾析除去培养基后,过滤回收微胶囊,并用无菌0.1%蛋白胨溶液清洗数次,制备得微胶囊;
(5)将步骤(4)制备完成的微胶囊与无菌果汁按1g/10mL进行混合混匀。
2.根据权利要求1所述的乳杆菌在低pH值果汁中微胶囊化包封方法,其特征在于,步骤(1)果胶的制备操作为:将干燥的鲜浆果研磨后,用调整至pH 6的柠檬酸‑柠檬酸钠溶液混合,于65℃水浴2小时提取果胶;于4000r/min条件下离心15‑25min,去除上清液后,用60%乙醇反复洗涤沉淀果胶2‑3次,置于55‑65℃烘箱中12h,收集至干燥箱中备用。
3.根据权利要求2所述的乳杆菌在低pH值果汁中微胶囊化包封方法,其特征在于,柠檬酸‑柠檬酸钠溶液与鲜浆果配比:50:1(V:W)。
4.根据权利要求1所述的乳杆菌在低pH值果汁中微胶囊化包封方法,其特征在于,步骤(2)中a活化菌种过程为:挑取乳酸菌种,在MRS固体培养基预培养,挑取菌种至新鲜MRS液体培养基预活化,37℃培养18h,同条件下活化2次;然后在4000r/min条件下离心15‑25min,倾去培养基后添加生理盐水继续离心2‑3次,收集沉淀物备用。
5.根据权利要求1所述的乳杆菌在低pH值果汁中微胶囊化包封方法,其特征在于,步骤(2)b的水浴灭菌采用95℃下水浴15min灭菌;乳酸菌沉淀物悬浮在果胶溶液中后,通过微涡旋混匀备用。
6.根据权利要求1所述的乳杆菌在低pH值果汁中微胶囊化包封方法,其特征在于,步骤(3)微胶囊成型装置的挤出孔0.4‑0.5mm、氮气压力0.3‑0.5bar;挤出速率通过注射泵控制。