1.大肠杆菌(Escherichia coli)zjut‑mho1，保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号：GDMCC No:62484，保藏日期2022年5月18日，地址：广州市先烈中路100号大院59号楼5楼，邮编：510075。

2.一种权利要求1所述大肠杆菌zjut‑mho1在发酵产血红素加氧酶‑1中的应用。

3.如权利要求2所述的应用，其特征在于，所述的应用为：大肠杆菌zjut‑mho1接种于含

50μg/mL卡那霉素的产酶培养基，于35–37℃、180–200r/min振荡培养至OD600＝0.824–2.17，加入终浓度为0.1–1.0mmol/L的IPTG，于25–30℃、180–200r/min诱导培养至OD600＝2.35–

8.21，获得含血红素加氧酶‑1的培养液；所述产酶培养基终浓度组成为：酵母浸出粉20–

30g/L，蛋白胨10–12.5g/L，甘油4–5g/L，K2HPO4 10–12.5g/L，KH2PO43–4g/L，溶剂为去离子水，pH 7.0–7.4。

4.如权利要求3所述的应用，其特征在于，所述大肠杆菌zjut‑mho1发酵前，先经种子扩大培养制备种子液，种子液以体积浓度3％–5％的接种量接种于含50μg/mL卡那霉素的产酶培养基。

5.如权利要求3所述的应用，其特征在于，含血红素加氧酶‑1的培养液离心收集湿菌体，湿菌体经超声破碎后离心获得细胞裂解液；细胞裂解液冷冻干燥，获得血红素加氧酶‑1冻干粉。

6.如权利要求5所述的应用，其特征在于，获得血红素加氧酶‑1冻干粉的方法为：含血红素加氧酶‑1的培养液经4℃、8000r/min离心5–10min，收集湿菌体后用pH 7.4、0.1mol/L的PBS缓冲液重悬，经超声波破碎菌体，4℃、10000r/min离心5–10min后收集上清液，获得细胞裂解液；细胞裂解液冷冻干燥，获得血红素加氧酶‑1冻干粉；所述超声破碎条件为：功率

300W，超声2s，间隔4s，工作200次。

7.如权利要求6所述的应用，其特征在于，所述细胞裂解液冷冻干燥方法为：将细胞裂解液于洁净培养皿中，放入‑80℃冷冻结冰，再转入‑40℃、真空度20Pa的冷冻干燥机中冷冻至完全干燥，得到血红素加氧酶‑1冻干粉。

8.如权利要求4所述的应用，其特征在于，所述大肠杆菌zjut‑mho1种子扩大培养方法为：按体积浓度1％的接种量，移取20％甘油水溶液冻存的大肠杆菌zjut‑mho1菌液，或接种环挑取大肠杆菌zjut‑mho1斜面菌体2次，接种到含50μg/mL卡那霉素的LB液体培养基中，37℃、180r/min摇床中培养10–12h至OD600＝3.03–3.42，得扩大培养的种子液；所述的LB液体培养基组成为：蛋白胨10g/L，酵母浸出粉5g/L，NaCl 10g/L，溶剂为去离子水，pH 7.2–7.4。

9.如权利要求3所述的应用，其特征在于，所述的产酶培养基组成为：酵母浸出粉24g/L，蛋白胨12g/L，甘油4g/L，K2HPO4 12.5g/L，KH2PO4 4g/L，溶剂为去离子水，pH 7.0。

10.如权利要求3所述的应用，其特征在于，所述的大肠杆菌zjut‑mho1发酵产血红素加氧酶‑1的步骤包括：(1)将低温保存的大肠杆菌zjut‑mho1菌体接种于含50μg/mL卡那霉素的LB斜面培养基，于37℃恒温培养24h，获得斜面菌体；所述的LB斜面培养基终浓度组成为：蛋白胨10g/L，酵母浸出粉5g/L，NaCl 10g/L，琼脂20g/L，溶剂为去离子水，pH 7.2–7.4；

(2)挑取步骤(1)的斜面菌体2环或按体积分数1％的接种量移取20％甘油水溶液冻存的大肠杆菌zjut‑mho1菌液，接种到含50μg/mL卡那霉素的LB液体培养基中，37℃、180r/min摇床中培养10–12h，得OD600＝3.03–3.42的种子液；

(3)按体积分数3％–5％的接种量，移取步骤(2)制备的种子液接种于含50μg/mL卡那霉素的产酶培养基中，于35–37℃、150–200r/min摇床中培养3–5h至OD600＝0.824–2.17，加入终浓度为0.1–1.0mmol/L的IPTG作为诱导剂，在25–30℃、150–200r/min的摇床中表达培养

6–10h，得OD600＝2.35–8.21的培养液；

(4)步骤(3)的培养液经4℃、8000r/min离心5–10min收集菌体，每克湿菌体沉淀中加入

5–12mL的pH 7.4、0.1mol/L PBS缓冲液重悬菌体；冰浴条件下超声波破碎细胞，4℃、

10000r/min离心5–10min，收集上清液，获得细胞裂解液；超声破碎条件为：功率300W，超声

2s，间隔4s，工作200次；

(5)将步骤(4)得到的细胞裂解液于无菌培养皿中，放入‑80℃冷冻结冰，再转入‑40℃、真空度20Pa的冷冻干燥机中冷冻至完全干燥，得到血红素加氧酶‑1冻干粉。