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专利号: 2022106664477
申请人: 上海海洋大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2026-06-16
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种快速同步检测MS‑222和孔雀石绿的方法,其特征在于,步骤包括:(1)将红色探针和蓝色探针与待测样品和层析液混合后滴加在免疫层析试纸的样品垫上;

红色探针和蓝色探针的制备方法为,在红色纳米胶体金颗粒和蓝色纳米胶体金颗粒上分别连接MS‑222抗体或孔雀石绿抗体中的一个;

所述的免疫层析试纸上设置检测线1、检测线2和质控线;所述的检测线1和检测线2分别包被有羧基化孔雀石绿‑BSA完全抗原和3‑氨基苯甲酸‑BSA完全抗原;所述的质控线包被羊抗鼠IgG;

(2)观察试纸条显色。

2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的红色纳米胶体金颗粒的粒径为10‑

40nm,制备方法包括以下步骤:

将沸腾氯金酸溶液与柠檬酸钠溶液混合,加热搅拌5‑20min;反应体系中的氯金酸浓度为0.5‑5mmol/L,柠檬酸钠浓度为3‑40mmol/L;

所述的蓝色胶体胶体金纳米颗粒的粒径为75‑100nm,制备方法包括以下步骤:将粒径为10‑40nm的红色胶体金颗粒与氯金酸溶液、柠檬酸钠溶液及对二苯酚溶液混合加热;反应体系中,红色胶体金与氯金酸的摩尔比为1:40‑150;

红色胶体金与氯金酸的摩尔比为1:50‑100。

3.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于,所述的红色纳米胶体金颗粒的粒径为

15‑25nm,蓝色纳米胶体金颗粒的粒径为80‑90nm。

4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的红色纳米胶体金颗粒上连接MS‑222抗体,所述的蓝色纳米胶体金颗粒上连接孔雀石绿抗体。

5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(2)中,通过肉眼定性观察,或者拍照后提取灰度值定量测定。

6.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,蓝色探针或红色探针的制备方法为:取红色胶体金溶液或者蓝色胶体金溶液,加入孔雀石绿抗体或MS‑222抗体中的一种,以及BSA和碳酸盐溶液,混合均匀后离心取沉淀洗涤;所述的碳酸盐为碳酸钾或碳酸钠,反应体系中的碳酸盐浓度为0.001‑0.002mol/L。

7.根据权利要求6所述的方法,其特征在于,反应体系的pH值为6‑10。

8.一种快速同步检测MS‑222和孔雀石绿的双色检测试剂盒,其特征在于,包括免疫层析试纸、红色探针和蓝色探针;

所述红色探针和蓝色探针的制备方法为,在红色纳米胶体金颗粒和蓝色纳米胶体金颗粒上分别连接MS‑222抗体或孔雀石绿抗体中的一个;

所述的免疫层析试纸上设置检测线1、检测线2和质控线;所述的检测线1和检测线2分别包被有羧基化孔雀石绿‑BSA完全抗原和3‑氨基苯甲酸‑BSA完全抗原;所述的质控线包被羊抗鼠IgG。

9.根据权利要求8所述的双色检测试剂盒,其特征在于,还包括层析液,所述的层析液为含有20‑50g/L吐温‑20和0‑300g/L BSA、pH=5.0‑7.5的磷酸盐缓冲液、硼酸盐缓冲液或三氨基甲烷缓冲液。