1.一种利用低共熔溶剂提取香榧假种皮中多酚类化合物的方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)香榧假种皮预处理
将新鲜采集的香榧假种皮烘干,使用粉碎机粉碎后,获得干燥的香榧假种皮粉末备用;
(2)酶液配置
将纤维素酶、果胶酶分别溶于pH=5的PBS缓冲液中,得到纤维素酶液、果胶酶液;
(3)制备低共熔溶剂
将氯化胆碱和三乙二醇混合,添加水后置于60~70℃下搅拌均匀,得到低共熔溶剂;
氯化胆碱和三乙二醇的摩尔比为1:5.2;
(4)提取多酚类化合物
在步骤(1)准备好的香榧假种皮粉末中加入步骤(2)配置的纤维素酶液和果胶酶液,纤维素酶液、果胶酶液均为2000u/mL,纤维素酶液在总酶液中的体积占比为57%,于25~35℃下酶解2~4h,然后加入步骤(3)制备的低共熔溶剂,提取料液比为1g:72mL,超声辅助提取1~3h,得到香榧假种皮多酚粗提液,离心,收集上清液,即为香榧假种皮多酚提取液。
2.如权利要求1所述的利用低共熔溶剂提取香榧假种皮中多酚类化合物的方法,其特征在于,步骤(3)中,所得低共熔溶剂中含水量在0~20%。
3.如权利要求1所述的利用低共熔溶剂提取香榧假种皮中多酚类化合物的方法,其特征在于,步骤(4)中,超声功率为240W,超声时间为2h。
4.一种利用低共熔溶剂提取香榧假种皮中多酚类化合物的工艺优化方法,所述的工艺优化方法为:(1)筛选出5个影响香榧假种皮多酚提取率的因素:提取溶剂的种类、低共熔溶剂中氢键供体和氢键受体的摩尔比、低共熔溶剂的含水量、总酶液中纤维素酶液的占比、提取料液比;
(2)以香榧假种皮多酚提取液中多酚含量为指标,对步骤(1)筛选出的5个因素进行单因素实验;
(3)根据步骤(2)的单因素实验结果,选取对香榧假种皮多酚提取液总酚含量影响较为显著的三个因素:低共熔溶剂中氢键供体和氢键受体的摩尔比(A)、提取料液比(B)、总酶液中纤维素酶液的占比(C)为自变量,以香榧假种皮提取液多酚含量为响应值,采用Box‑Behnken设计‑响应面法设计三因素三水平的响应面分析试验;
应用统计学软件Design‑Expert 12.0对上述响应面试验设计数据进行回归拟合分析,得到香榧假种皮提取液总酚含量(Y)的二次多项回归方程预测模型Y=36.13+0.5869A+
2 2 2
1.32B‑0.1852C‑0.2510AB+0.1003AC‑1.11BC‑1.61A ‑3.73B ‑1.23C ;应用统计学软件Design‑Expert 12.0对提取工艺进行优化,得到最佳提取工艺条件,并根据所得最佳提取工艺进行验证试验;
最佳提取工艺条件为:低共熔溶剂中氢键受体和氢键供体的摩尔比1:5.16157、提取料液比1:71.9566g/mL、总酶液中纤维素酶液占比56.87%;香榧假种皮多酚提取液总酚含量预测值为36.3175mg/g。