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专利号: 2022106468537
申请人: 浙江工业大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2026-07-29
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种铁皮石斛叶中分离制备两种芹菜素糖苷的方法,其特征在于,所述方法包括以下步骤:

(1)原料铁皮石斛叶烘干后粉碎,用70%甲醇的水溶液超声提取,得到甲醇粗提物;

(2)甲醇粗提物用纯水溶解,用石油醚萃取,弃去上相石油醚萃取液,下相用乙酸乙酯萃取,弃去上相乙酸乙酯萃取液,下相用正丁醇萃取,将正丁醇萃取液真空回收溶剂,得到正丁醇萃取物;

(3)在分液漏斗中加入水、正丁醇和乙酸乙酯,组成混合溶剂体系,充分振摇后静置分层,取上相作为液液色谱的固定相,下相作为流动相;

所述混合溶剂体系中,水、正丁醇和乙酸乙酯的体积份数分别为5份、3份、2份;

(4)取步骤(2)所得正丁醇萃取物用步骤(3)所述固定相和流动相溶解,得到样品溶液;

(5)取固定相注满液液色谱仪的分离柱,开启速度控制器,使分离柱正转,在500~

1000r/min转速下,以0.5~5mL/min的流速注入流动相,等到柱尾端流出流动相时,表明两相已达到平衡,这时将样品溶液由进样阀注入分离柱,波长210~280nm的紫外检测器检测,用自动部分收集器收集洗脱液,收集得到的洗脱液通过高效液相进行检测,分别合并与芹菜素‑6‑C‑β‑D‑吡喃葡萄糖‑8‑C‑β‑D‑木糖苷标准品、芹菜素‑6‑C‑β‑D‑木糖‑8‑C‑α‑L‑阿拉伯糖苷标准品保留时间相同的洗脱液,减压蒸除溶剂,得到芹菜素‑6‑C‑β‑D‑吡喃葡萄糖‑

8‑C‑β‑D‑木糖苷、芹菜素‑6‑C‑β‑D‑木糖‑8‑C‑α‑L‑阿拉伯糖苷。

2.如权利要求1所述的铁皮石斛叶中分离制备两种芹菜素糖苷的方法,其特征在于,步骤(1)中,所述超声提取的方法为:将粉碎后的铁皮石斛叶用其10~20倍干重的70%甲醇的水溶液超声提取,提取温度25~35℃,提取时间1h,趁热过滤,滤渣重复提取1~3次,合并提取液,真空回收溶剂得到甲醇粗提物。

3.如权利要求1所述的铁皮石斛叶中分离制备两种芹菜素糖苷的方法,其特征在于,步骤(4)中,所述固定相和流动相的体积相等,两者合计用量以铁皮石斛叶正丁醇萃取物样品的质量计为0.10~0.14mL/mg。

4.如权利要求1所述的铁皮石斛叶中分离制备两种芹菜素糖苷的方法,其特征在于,步骤(5)中,所述样品溶液的进样体积小于分离柱柱体积的30%。

5.如权利要求1所述的铁皮石斛叶中分离制备两种芹菜素糖苷的方法,其特征在于,步骤(5)中,在用高效液相色谱检测洗脱液中的目标物质时,检测条件为:H&E SP ODS‑A C18 column;柱温30℃;流动相为甲醇(A)‑水(B)溶液,梯度洗脱模式:0~6min,25%~30%A;6~25min,30%~45%A;25~40min,45%~60%A;流速:1mL/min;检测波长:340nm;进样量:

20μL。