利索能及
我要发布
收藏
专利号: 2022104843400
申请人: 广州大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2026-08-04
缴费截止日期: 暂无
联系人

摘要:

权利要求书:

1.一种生物合成5‑羟基吡虫啉和olefin吡虫啉的方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)将白腐真菌YK‑624接种培养在土豆葡萄糖琼脂培养基中进行传代扩大培养;

(2)在传代培养的土豆葡萄糖琼脂培养基中截取出菌丝片,并接种到液体培养基中,所述液体培养基为Kirk液体培养基;

所述Kirk液体培养基的组成为:按每升计,包括10g葡萄糖、0.221g酒石酸铵、1.64g无水乙酸钠、1g Tween 80和100mL Kirk盐溶液,所述Tween 80在振荡培养时加入;

所述Kirk盐溶液的组成为:按每升计,包括20g KH2PO4,5g MgSO4·7H2O,1.3g CaCl2·

2H2O,0.01g盐酸硫铵,16.7mL Kirk微量元素溶液;

所述Kirk微量元素溶液的组成为:按每升计,包括9g Nitrilotriace,3g MgSO4·7H2O,

4.2gMnSO4·H2O,6g NaCl,0.6g FeSO4·7H2O,1.1g CoSO4·7H2O,1.1g ZnSO4·7H2O,0.6g CaCl2·2H2O,0.06g CuSO4·5H2O,0.11g AlK(SO4)2·12H2O,0.06g H3BO3,0.07g Na2MoO4·

2H2O;

(3)加入吡虫啉并进行振荡培养;

(4)分离培养液并以有机溶剂萃取;

(5)上清液浓缩后用硅胶色谱法进行梯度洗脱,硅胶色谱法分离得到的产物再通过制备液相色谱进一步分离纯化,制得所述5‑羟基吡虫啉和olefin吡虫啉。

2.根据权利要求1所述的生物合成5‑羟基吡虫啉和olefin吡虫啉的方法,其特征在于,所述土豆葡萄糖琼脂培养基按质量分数计,包括20%的土豆、2%的葡萄糖和2%的琼脂。

3.根据权利要求1所述的生物合成5‑羟基吡虫啉和olefin吡虫啉的方法,其特征在于,步骤(3)所述振荡培养的时间在20d。

4.根据权利要求1所述的生物合成5‑羟基吡虫啉和olefin吡虫啉的方法,其特征在于,步骤(4)所述有机溶剂为乙酸乙酯。

5.根据权利要求1所述的生物合成5‑羟基吡虫啉和olefin吡虫啉的方法,其特征在于,步骤(4)所述萃取的方法是:加入与培养液等体积的有机溶剂进行萃取次数3次,合并上层清液。

6.根据权利要求1所述的生物合成5‑羟基吡虫啉和olefin吡虫啉的方法,其特征在于,所述制备液相色谱的色谱柱型号为Inertsil C30 S‑Select 5m 20x250mm。