利索能及
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专利号: 2022104503998
申请人: 江苏海洋大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2025-10-14
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种大型海藻中环二肽类抑藻活性化合物的分离纯化方法,所述方法包括如下步骤:

(1)裙带菜干粉末加入无水甲醇,20℃下浸提24h后,获得浸提液;反复浸提2次,合并浸提液;经过滤和减压蒸干,制备到浸膏,此浸膏加入50%甲醇水溶液,充分振荡,4℃下静置

4h,离心、过滤,弃去沉淀,收集上清液;

(2)往步骤(1)中制备的上清液中加入乙酸乙酯,萃取;上层减压蒸干,获得乙酸乙酯组分A;下层减压蒸发除出乙酸乙酯后,加入正丁醇萃取,上层和下层分别减压蒸干,获得正丁醇组分B和蒸馏水组分C;上述3种组分分别溶解于无水甲醇中,制备到3种甲醇溶液;采用原位薄层层析法,经茚三酮喷雾显色,检测出组分A含有环肽类化合物;

(3)此组分采用硅胶柱层析进行分离,以二氯甲烷/甲醇为洗脱剂进行梯度洗脱,得到4个组分,分别为F1、F2、F3和F4;所述4个组分均呈现出环肽类化合物的阳性反应;

(4)将步骤(3)中所述的4个组分再次进行硅胶柱层析分离,组分F1再分为组分F11、F12、F13和F14;组分F2再分为组分F21、F22和F23;组分F3再分为组分F31;组分F4依次再分为F41、F42、F43和F44;抑藻活性检测表明,上述12个再分组分中,F22、F23、F43和F44对米氏凯伦藻和球形棕囊藻的生长表现出强烈的抑制作用;4个再分组分中,F23和F43呈现了环肽类化合物的阳性反应;

(5)将F23和F43分别采用Sephadex LH‑20凝胶柱层析进行纯化,最终,得到2个样品F231和F431;样品F231和F431分别是环(丙氨酸‑色氨酸)和环(脯氨酸‑丙氨酸)。