1.一种普鲁兰酶突变体，其特征在于，所述普鲁兰酶突变体是将SEQ ID NO.1 所示氨基酸序列突变为下列之一：（1）第365位丙氨酸突变为缬氨酸；（2）第401位缬氨酸突变为半胱氨酸；（3）第504位苏氨酸突变为缬氨酸；（4）第499位组氨酸突变为丙氨酸；（4）第365位丙氨酸突变为缬氨酸、第401位缬氨酸突变为半胱氨酸；（5）第365位丙氨酸突变为缬氨酸、第

401位缬氨酸突变为半胱氨酸、第504位苏氨酸突变为缬氨酸；（6）第365位丙氨酸突变为缬氨酸、第401位缬氨酸突变为半胱氨酸、第504位苏氨酸突变为缬氨酸、第499位组氨酸突变为丙氨酸。

2.一种含权利要求1所述普鲁兰酶突变体的编码基因的重组载体。

3.一种含权利要求2所述重组载体的重组基因工程菌。

4.如权利要求3所述的重组基因工程菌，其特征在于，所述重组基因工程菌按如下方法构建：将普鲁兰酶突变体连入pET 32a(+)的EcoR V 与 Xho I位点，转入E. coli BL21(DE3) 感受态细胞，获得所述的重组基因工程菌。

5.一种权利要求1所述普鲁兰酶突变体在制备普鲁兰酶中的应用。

6.如权利要求5所述的应用，其特征在于，所述的应用为：将普鲁兰酶突变体重组基因工程菌诱导培养后，取噬菌体用缓冲液重悬，超声破碎，破碎液再进行镍柱纯化，获得普鲁兰酶蛋白。

7.如权利要求6所述的应用，其特征在于，所述普鲁兰酶突变体重组基因工程菌诱导培养方法为：将普鲁兰酶突变体重组基因工程菌接种到含有50 μg/mL卡钠霉素与100 μg/mL氨苄抗生素的LB液体培养基中，37 ℃，220 rpm活化培养过夜，获得种子液；将种子液以体积浓度1‑5%转接到含50 μg/mL卡钠霉素与100 μg/mL 氨苄抗生素的LB液体培养基中，37 ℃、220 rpm培养至发酵液OD值达到0.6‑0.8后，加入终浓度为0.15 mM的IPTG，低温16 ℃继续诱导培养20小时；发酵液4 ℃、12，000 rpm离心10 min，收集噬菌体。

8.如权利要求6所述的应用，其特征在于，所述普鲁兰酶蛋白按如下方法制备：（1）将噬菌体悬浮于50 mM、pH 7.5的PBS缓冲液，利用超声破碎仪破碎细胞10min，破碎条件：功率为

350 W，破碎1 s，暂停1 s；然后4 ℃、12，000 rpm离心30 min，收集上清，制得粗酶液；（2）将o粗酶液在4  C、8000 rpm 条件下离心10 min，去沉淀，上清液经0.22 μm的滤膜过滤后，滤液作为上样液，以0.25 mL/min速度上样镍柱，上样量为有效柱体积的2 %；先用冲洗缓冲液洗脱杂蛋白，流速 1 mL/min，洗脱量为5‑10个柱体积，洗脱至基线平衡，使得杂蛋白完全被冲洗掉；再用洗脱缓冲液洗脱目的蛋白，流速为1 mL/min，通过观察检测器紫外吸收值进行监测，当紫外吸收值相对于基线向上扬起时用试管收集洗脱液，当紫外吸收值回到基线时o停止收集，将收集到的洗脱液装入透析袋，置于pH 7.0、20 mM的PBS溶液中4  C透析12 h，透析后截留液即为普鲁兰酶蛋白纯酶液；所述冲洗缓冲液为含0.3 M NaCl和20 mM咪唑的

20 mM，pH7.0的磷酸钠缓冲液；所述洗脱缓冲液为含0.3 M NaCl和500 mM咪唑的20 mM，pH 

7.0的磷酸钠缓冲液。

9.一种权利要求1所述普鲁兰酶突变体在淀粉糖化中的应用。