1.一种提高金银花中木犀草素含量的重组基因在提高金银花中木犀草素含量方面的应用,所述重组基因的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示。
2.一种提高金银花中木犀草素含量的重组基因的植物表达载体在提高金银花中木犀草素含量方面的应用,所述重组基因的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示。
3.一种提高金银花中木犀草素含量的方法,其特征在于,所述方法包括:构建重组质粒,所述重组质粒包含核苷酸序列如SEQ ID No.2所示的重组基因;
采用农杆菌介导法将重组质粒转入到金银花叶片中,进行培养,获得目的植株。
4.根据权利要求3所述的提高金银花中木犀草素含量的方法,其特征在于,构建重组质粒的步骤为:提取金银花RNA,反转录获得cDNA,以cDNA为模板,设计引物,在MYB12基因的上下游均引入KpnI酶切位点,利用高保真酶从cDNA模板中扩增MYB12基因序列,回收扩增出来的含有MYB12基因的PCR产物;
使用KpnI内切酶将PCambia2301‑JC酶切成线性化载体,用同源重组法将MYB12基因与线性化PCambia2301‑JC载体连接,热激法将重组载体导入大肠杆菌DH5ɑ感受态,菌液PCR检测阳性菌落,提取阳性质粒,测序后获得含有目的基因的重组质粒。
5.根据权利要求4所述的提高金银花中木犀草素含量的方法,其特征在于,将构建成功的重组质粒导入农杆菌中,进行培养;
将培养好的农杆菌在室温下离心,弃掉废液,加入渗透培养基重悬菌体,室温下搅拌;
渗透培养基重悬后的农杆菌,注射到金银花叶片中。