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专利号: 2022102125010
申请人: 西南大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2026-08-25
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种通过特异调控家蚕内源丝蛋白提高蚕丝机械性能的方法,其特征在于,其通过特异启动子FibH、FibL调控家蚕内源丝蛋白FibL、P25基因,育成四种蚕丝机械性能优异的家蚕品系,育成之品系由于丝素蛋白含量和组装的差异,使蚕丝机械性能较其改造前大幅提升。

2.依据权利要求1所述的通过特异调控家蚕内源丝蛋白提高蚕丝机械性能的方法,其特征在于,其包括以下步骤:

步骤S1,获得基于特异调控家蚕丝蛋白FibL提高蚕丝力学性能的家蚕转基因系统;

步骤S2,获得基于特异调控家蚕丝蛋白P25提高蚕丝力学性能的家蚕转基因系统;

步骤S3,多种产高力学性能蚕丝的家蚕品系以扩展蚕丝在各领域当中的应用。

3.依据权利要求2所述的通过特异调控家蚕内源丝蛋白提高蚕丝机械性能的方法,其特征在于,获得基于特异调控家蚕丝蛋白FibL提高蚕丝力学性能的家蚕转基因系统中的家蚕FibL基因为SEQ ID NO.1。

4.依据权利要求3所述的通过特异调控家蚕内源丝蛋白提高蚕丝机械性能的方法,其特征在于,家蚕转基因系统通过蚕丝蛋白FibH启动子或FibL启动子调控目的基因只在后部丝腺进行表达,蚕丝蛋白FibH启动子为SEQ ID NO.3或FibL启动子序列为SEQ ID NO.4,基于序列SEQ ID NO.3和序列SEQ ID NO.4构建表达载体。

5.依据权利要求4所述的通过特异调控家蚕内源丝蛋白提高蚕丝机械性能的方法,其特征在于,调控FibL的表达载体如下方式制备:直接合成家蚕FibL蛋白的编码序列,采用BamHI和Not I双酶切合成质粒并回收目的片段FibL,装到经同样酶切的亚克隆载体p57S[FibH‑MCS‑LBS],该亚克隆载体由FibH启动子(SEQ ID NO.3)串联多克隆位点及LBS(与fibL结合位点)序列(SEQ ID NO.5)或p57S[FibL‑MCS‑LpA]该亚克隆由FibL启动子(SEQ ID NO.4)串联多克隆位点及LpA(fibL的终止信号)序列(SEQ ID NO.6)中,构建获得p57S[FibH‑FibL CDS‑LBS]和p57S[FibL‑FibL CDS‑LpA]。

6.依据权利要求5所述的通过特异调控家蚕内源丝蛋白提高蚕丝机械性能的方法,其特征在于,步骤S2获得基于特异调控家蚕丝蛋白P25提高蚕丝力学性能的家蚕转基因系统包括以下步骤:步骤S2‑1,一种特异调控蚕丝蛋白P25的家蚕转基因系统,家蚕P25基因如SEQ ID NO.10所示;

步骤S2‑2,家蚕转基因系统通过蚕丝蛋白FibH启动子或FibL启动子调控目的基因只在后部丝腺表达,蚕丝蛋白FibH启动子(SEQ ID NO.3)或FibL启动子(SEQ ID NO.4)序列所示,基于序列SEQ ID NO.4和序列SEQ ID NO.4构建表达载体。

7.依据权利要求5所述的通过特异调控家蚕内源丝蛋白提高蚕丝机械性能的方法,其特征在于,步骤S2进一步包括步骤S2‑3,调控P25的表达载体如下方式制备:直接合成家蚕P25蛋白的编码序列,采用BamH I和Not I双酶切合成质粒并回收目的片段P25,装到经同样酶切的亚克隆载体p57S[FibH‑MCS‑LBS]或p57S[FibL‑MCS‑LpA]中,构建获得p57S[FibH‑FibL CDS‑LBS]和p57S[FibL‑FibL CDS‑LpA]。

8.依据权利要求5所述的通过特异调控家蚕内源丝蛋白提高蚕丝机械性能的方法,其特征在于,步骤S2进一步包括步骤步骤S2‑4,利用Asc I单酶切上述两种载体质粒,将回收的目的片段分别与经同样酶切的pBac[3×P 3ECFPafm]、pBac[3×P 3RFPafm]骨架载体连接,获得最终表达载体pB[FibH‑P25 CDS‑LBS,3×P 3RFP]、pB[FibL‑P25 CDS‑LpA,3×P 

3ECFP]。

9.一种通过特异调控家蚕内源丝蛋白提高蚕丝机械性能的家蚕品种,其特征在于,其为通过权利要求1‑权利要求8之任一的通过特异调控家蚕内源丝蛋白提高蚕丝机械性能的方法获得家蚕品种,其为通过调控家蚕丝蛋白FibL或P25基因,育成大幅提高蚕丝机械性能的家蚕品系。