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专利号: 2022101446245
申请人: 齐鲁工业大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 有机化学〔2〕
更新日期:2024-10-29
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种蒜氨酸的分离纯化方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)采用硫酸铵、氯化钠、正丙醇、pH 为2.4伯瑞坦‑罗比森缓冲溶液组成的双水相体系,处理灭酶蒜粉,下相即为粗提液;

(2)向步骤(1)的粗提液通过醇沉除去多糖、无机盐,离心,将上清液减压回收乙醇,烘干,得蒜氨酸粗提物固体粉末;

(3)采取30%磷酸二氢钠‑乙醇‑丙酮为溶剂体系,取步骤(2)的固体粉末加入到已达到平衡之后的溶剂系统中,并超声使其完全溶解后,从进样阀中注入高速逆流色谱仪,采用高速逆流色谱仪进行纯化。

2.根据权利要求1所述的蒜氨酸的分离纯化方法,其特征在于,步骤(3)溶剂体系的30%磷酸二氢钠‑乙醇‑丙酮的体积比为6:3:1.5。

3.根据权利要求1所述的蒜氨酸的分离纯化方法,其特征在于,步骤(3)的溶剂体系平衡后分为上下两相,上相作为高速逆流色谱仪的固定相,下相为高速逆流色谱仪的流动相。

4.根据权利要求3所述的蒜氨酸的分离纯化方法,其特征在于,步骤(2)的固体粉末加入到已达到平衡之后的上、下两相溶剂系统,并超声使其完全溶解;所述的固体粉末与上、下两相溶剂的加入量比值为400mg:10mL:10mL。

5. 根据权利要求1‑4任一所述的蒜氨酸的分离纯化方法,其特征在于,所述步骤(3)中高速逆流色谱仪的具体参数为:将固定相以 20 m L/min 的流速泵入高速逆流色谱仪的螺旋管中,待固定相充满螺旋管后,开启高速逆流色谱仪,调整转速为 1050 rpm,同时流动相以 1.8 m L/min 的流速泵入充满固定相后的螺旋管中,待末端有流动相流出时,即螺旋管中上下相已达到动态平衡:然后将备好的样品溶液从进样阀中注入高速逆流色谱仪,经过高速逆流色谱分离后,在 25 30 min 收集到目标馏分。

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6. 根据权利要求1所述的蒜氨酸的分离纯化方法,其特征在于,所述步骤(1)中双水相体系为:19% (w/w) 硫酸铵/8.54% (w/w) 氯化钠 /20% (w/w)正丙醇/ pH 为 2.4伯瑞坦‑罗比森缓冲溶液组成的双水相体系。