1.一种硫化铜纳米材料,其特征在于,所述硫化铜纳米材料为球状CuS/TGF‑β1@PC核壳结构纳米粒子,该核壳结构纳米粒子以硫化铜纳米颗粒为核、磷脂酰胆碱为壳;其中,硫化铜纳米颗粒表面负载有氨基,所述氨基接枝TGF‑β1质粒DNA;
所述硫化铜纳米材料的制备方法包括以下步骤:
(1)硫化铜纳米颗粒的制备:将二价铜离子和L‑半胱氨酸溶解于去离子水中,接着往里滴加含有硫代硫酸钠的去离子水溶液,加热搅拌反应,反应结束后冷却至室温、离心、洗涤,取沉淀干燥,得硫化铜纳米颗粒;
(2)CuS‑NH2纳米颗粒的制备:将硫化铜纳米颗粒加入到无水乙醇中分散均匀,接着加入
3‑氨丙基三乙氧基硅烷,室温搅拌反应,反应结束后离心、洗涤,取沉淀干燥,得CuS‑NH2纳米颗粒;
(3)CuS/TGF‑β1复合纳米颗粒的制备:将CuS‑NH2纳米颗粒溶于无菌去离子水中,接着加入编码TGF‑β1质粒DNA混合均匀,静置,得含有CuS/TGF‑β1复合纳米颗粒的溶液;
(4)磷脂酰胆碱膜的制备:将磷脂酰胆碱溶于无水乙醇中形成混悬液,接着于容器中加热搅拌,除去无水乙醇,在容器内壁上形成磷脂酰胆碱膜;
(5)硫化铜纳米材料的制备:将步骤(3)中含有CuS/TGF‑β1复合纳米颗粒的溶液与步骤(4)所述磷脂酰胆碱膜混合超声,得硫化铜纳米材料;
所述步骤(1)中,二价铜离子、L‑半胱氨酸和硫代硫酸钠的摩尔比为二价铜离子:L‑半胱氨酸:硫代硫酸钠=1:(1‑3):(1‑3);所述加热搅拌反应的温度为85‑95℃,反应的时间为
1.5‑2.5小时;所述离心的转速为3500‑4500rpm,所述离心的时间为10‑20分钟;
所述步骤(2)中,硫化铜纳米颗粒与无水乙醇的质量体积比为(0.8‑1.2)mg:10mL;3‑氨丙基三乙氧基硅烷与无水乙醇的质量体积比为(9‑11)mg:1mL;室温搅拌反应的时间为22‑
26小时;
所述步骤(3)中,编码TGF‑β1质粒DNA与步骤(2)中硫化铜纳米颗粒的质量比为1:(10‑
30);静置的时间为50‑70分钟;
所述步骤(4)中,磷脂酰胆碱与步骤(2)中硫化铜纳米颗粒的质量比为1:(1‑5);
所述步骤(5)中,超声的频率为35‑45kHz,超声的电压为220V,超声的时间为10‑20分钟。
2.根据权利要求1所述的硫化铜纳米材料,其特征在于,所述球状CuS/TGF‑β1@PC核壳结构纳米粒子的直径为90‑150nm,核的直径为80‑140nm,壳的厚度为1‑5nm。
3.如权利要求1或2所述的硫化铜纳米材料的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)硫化铜纳米颗粒的制备:将二价铜离子和L‑半胱氨酸溶解于去离子水中,接着往里滴加含有硫代硫酸钠的去离子水溶液,加热搅拌反应,反应结束后冷却至室温、离心、洗涤,取沉淀干燥,得硫化铜纳米颗粒;
(2)CuS‑NH2纳米颗粒的制备:将硫化铜纳米颗粒加入到无水乙醇中分散均匀,接着加入
3‑氨丙基三乙氧基硅烷,室温搅拌反应,反应结束后离心、洗涤,取沉淀干燥,得CuS‑NH2纳米颗粒;
(3)CuS/TGF‑β1复合纳米颗粒的制备:将CuS‑NH2纳米颗粒溶于无菌去离子水中,接着加入编码TGF‑β1质粒DNA混合均匀,静置,得含有CuS/TGF‑β1复合纳米颗粒的溶液;
(4)磷脂酰胆碱膜的制备:将磷脂酰胆碱溶于无水乙醇中形成混悬液,接着于容器中加热搅拌,除去无水乙醇,在容器内壁上形成磷脂酰胆碱膜;
(5)硫化铜纳米材料的制备:将步骤(3)中含有CuS/TGF‑β1复合纳米颗粒的溶液与步骤(4)所述磷脂酰胆碱膜混合超声,得硫化铜纳米材料;
所述步骤(1)中,二价铜离子、L‑半胱氨酸和硫代硫酸钠的摩尔比为二价铜离子:L‑半胱氨酸:硫代硫酸钠=1:(1‑3):(1‑3);所述加热搅拌反应的温度为85‑95℃,反应的时间为
1.5‑2.5小时;所述离心的转速为3500‑4500rpm,所述离心的时间为10‑20分钟;
所述步骤(2)中,硫化铜纳米颗粒与无水乙醇的质量体积比为(0.8‑1.2)mg:10mL;3‑氨丙基三乙氧基硅烷与无水乙醇的质量体积比为(9‑11)mg:1mL;室温搅拌反应的时间为22‑
26小时;
所述步骤(3)中,编码TGF‑β1质粒DNA与步骤(2)中硫化铜纳米颗粒的质量比为1:(10‑
30);静置的时间为50‑70分钟;
所述步骤(4)中,磷脂酰胆碱与步骤(2)中硫化铜纳米颗粒的质量比为1:(1‑5);
所述步骤(5)中,超声的频率为35‑45kHz,超声的电压为220V,超声的时间为10‑20分钟。
4.如权利要求1或2所述的硫化铜纳米材料在制备工程化间充质干细胞上的应用,其特征在于,所述应用包括以下步骤:将浓度为12.5‑100μg/mL的硫化铜纳米材料加入到含有间充质干细胞的培养基中,无血清培养2‑4小时后洗涤,接着更换含血清培养基继续培养24小时,得工程化间充质干细胞。
5.如权利要求4所述的工程化间充质干细胞在制备治疗骨关节炎药物上的应用。