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专利号: 2021115008218
申请人: 菏泽学院
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2026-05-14
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.泡桐丛枝植原体胸苷酸合成酶多克隆抗体,其特征在于,是以氨基酸序列如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.4所示的融合蛋白为免疫原免疫兔获得;所述的免疫原与佐剂混合乳化后进行免疫,分别在第1天、第21天、第35天和第49天进行免疫,初次免疫抗原为弗氏完全佐剂+蛋白抗原,后三次免疫抗原为弗氏不完全佐剂+蛋白抗原;

所述融合蛋白的制备方法包括以下步骤:

(1)将如SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.6所示的泡桐丛枝植原体胸苷酸合成酶的基因重组于pET‑28a载体的BamHI酶切位点和XhoI酶切位点之间,得到重组载体;

(2)将步骤(1)制备的重组载体转入菌株Escherichia coli BL21(DE3)中,得到重组菌株;

(3)培养步骤(2)制备的重组菌株,通过IPTG诱导表达;

(4)目标蛋白的检测与纯化,纯化步骤用到的菌体裂解液和杂蛋白清洗液中加入1%NP‑

40和0.25% Tween‑20。

2.根据权利要求1所述的泡桐丛枝植原体胸苷酸合成酶多克隆抗体,其特征在于,所述的融合蛋白制备方法中用于构建步骤(1)中所述的重组载体的正向引物为thyAF‑BamHI,其核苷酸序列如SEQ ID NO.7所示,反向引物为thyAR‑XhoI,其核苷酸序列如SEQ ID NO.8所示。

3.权利要求1‑2任一所述的泡桐丛枝植原体胸苷酸合成酶多克隆抗体在泡桐丛枝植原体检测或植原体胸苷酸合成酶检测中的应用。

4.根据权利要求3所述的应用,其特征在于,所述检测的方法为蛋白质免疫印记法、免疫荧光显微镜法或免疫电子显微镜法。

5.一种泡桐丛枝植原体或植原体胸苷酸合成酶的检测产品,其特征在于,所述的产品含有权利要求1‑2任一所述的泡桐丛枝植原体胸苷酸合成酶多克隆抗体。