1.一种假病毒系统,其特征在于:将SARS‑CoV‑2的部分病毒基因组整合到慢病毒表达质粒中,在其包膜上表达刺突(S)糖蛋白,以模拟SARS‑CoV‑2的功能结构;所述SARS‑CoV‑2的部分病毒基因组为含有SARS‑CoV‑2 ORF1ab基因、N基因、E基因的部分序列;所述慢病毒表达质粒为pCMV3‑2019‑nCoV‑Spike(S1+S2)、pLV‑SARS‑CoV‑2‑N‑GFP和pMD2质粒,所述pLV‑SARS‑CoV‑2‑N‑GFP质粒为含有SARS‑CoV‑2 ORF1ab基因、N基因、E基因的部分序列和GFP报告基因的质粒;所述假病毒系统是利用Lipofectamine 8000 将pCMV3‑2019‑nCoV‑Spike(S1+S2)、pLV‑SARS‑CoV‑2‑N‑GFP和pMD2质粒三种共转染HEK‑293FTcells,转染后收集病毒上清并混合;然后离心清除细胞碎片,将细胞上清置于蔗糖溶液上,使用Beckman SW28转子离心得到病毒沉淀。
2.一种新冠病毒(SARS‑CoV‑2)完整病毒颗粒的检测方法,包括假病毒产生、假病毒鉴定、亲和抗体的筛选、羧基磁珠与抗体偶联、SARS‑CoV‑2定量RT‑qPCR检测;所述假病毒产生是利用Lipofectamine 8000将pCMV3‑2019‑nCoV‑Spike(S1+S2)、pLV‑SARS‑CoV‑2‑N‑GFP和pMD2质粒三种共转染HEK‑293FTcells,转染后48h和72h收集病毒上清并混合;所述pLV‑SARS‑CoV‑2‑N‑GFP质粒为含有SARS‑CoV‑2ORF1ab基因、N基因、E基因的部分序列和GFP报告基因的质粒;4℃ 3000g离心10分钟清除细胞碎片后将细胞上清置于20%蔗糖溶液上,使用Beckman SW50.1转子4°C 25,000 rpm离心15 h获得假病毒沉淀;所述假病毒鉴定是利用SARS‑CoV‑2假病毒和编码GFP的对照假病毒感染过表达hACE2或空载慢病毒质粒转染HEK‑
293FT细胞,感染48小时和72小时荧光显微镜下观察假病毒感染情况,同时在72小时收集上清液,进行荧光定量PCR检测是否有病毒颗粒分泌;采用鼠抗SARS‑CoV‑2 S单克隆抗体进行western blot检测确定S蛋白融入假病毒的效率;利用2019‑nCoV核酸检测试剂盒采用RT‑qPCR检测假病毒中的SARS‑CoV‑2 ORF1ab基因确保SARS‑CoV‑2病毒基因组成功融入慢病毒;所述亲和抗体筛选为利用SARS‑CoV‑2假病毒裂解液和病毒颗粒分别进行SDS‑PAGE电泳和琼脂糖凝胶电泳进行解析和转膜后,鼠/人抗SARS‑CoV‑2 S/M单克隆抗体作为一抗,HRP‑羊抗鼠单克隆抗体作为二抗进行最佳特异性和亲和力抗体的筛选;所述羧基磁珠与抗体偶联为用NHS和EDC溶液在25°C下连续激活羧基磁珠30分钟后;将已激活的MSP‑COOH‑F1 加入稀释后的CQ25抗体中,混合后在4℃旋转4小时,分离上清后,用1% BSA溶液在25°C下温和封闭复合物30分钟;最后用偶联后磁珠和分离的上清液进行SDS‑PAGE凝胶电泳和考马斯蓝染色评价偶联效果;所述SARS‑CoV‑2定量RT‑qPCR检测为将磁珠抗体复合物与假病毒在PBS缓冲液中常温旋转混合45分钟,捕获后的复合物采用新型冠状病毒核酸检测试剂盒,在Bio‑ rad CFX96系统中检测SARS‑CoV‑2 RNA水平。