1.一种检测新型冠状病毒SARS‑CoV‑2的比色法试纸条,所述比色法试纸条包括底板和沿层析方向依次设置在底板上的样品垫、结合垫、检测垫和吸收垫,所述检测垫上设有检测线和控制线,其特征在于,所述结合垫上喷涂有分别由检测探针DetProbe C1和检测探针DetProbe C2修饰的MoS2@Au纳米球,所述纳米球能结合新型冠状病毒;所述检测垫检测线处先后喷涂有链霉亲和素和探针T‑DNA,所述检测垫控制线处先后喷涂有链霉亲和素和探针C‑DNA;
所述检测探针DetProbe C1和检测探针DetProbe C2均由polyA方式修饰,所述探针T‑DNA和探针C‑DNA均由生物素修饰;
所述检测探针DetProbe C1和探针C‑DNA的碱基序列,除采用polyA和生物素修饰部分外,其余碱基序列互补;所述检测探针DetProbe C2和探针T‑DNA的碱基序列,除采用polyA和生物素修饰部分外,其余碱基序列完全相同;
所述检测探针DetProbe C1的碱基序列为:5’‑AAAAA‑GCTGGATGTCGCTTACGACAATATTCCTTAGGGGCACCGCTACATTGACACATCCAGC‑3’;
和/或,所述检测探针DetProbe C2的碱基序列为:
5’‑AAAAA‑GCTGGATGTCACCGGATTGTCGGACATCGGATTGTCTGAGTCATATGACACATCCAGC‑3’;
和/或,所述探针T‑DNA的碱基序列为:
5’‑Biotin‑GCTGGATGTGTCATATGACTCAGACAATCCGATGTCCGACAATCGGGAGACATCAGC‑3’;
和/或,所述探针C‑DNA的碱基序列为:
5’‑Biotin‑GCTGGATGTGTCAATGTAGCGGTGCCCCTAAGGAATATTGTCGTAAGCGACATCCAGC‑3’。
2.一种如权利要求1所述的检测新型冠状病毒SARS‑CoV‑2的比色法试纸条的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:(1)MoS2@Au NP‑DetProbe C2复合物的制备:
①在MoS2量子点溶液中加入聚乙烯吡咯烷酮,搅拌反应,再加入氯金酸溶液,继续搅拌反应,然后离心取上清液,超声清洗获得MoS2量子点为核,金为壳的MoS2@Au纳米球溶液;
②用D‑PBS缓冲液将检测探针DetProbe C1配制成DetProbe C1溶液,将DetProbe C1溶液、三(2‑羧乙基)膦盐酸盐溶液加入到MoS2@Au纳米球溶液中,搅拌反应,然后加入三磷酸腺嘌呤脱氧核苷酸溶液,继续搅拌反应,反应结束后将其冷藏,待其稳定后离心,取沉淀用D‑PBSB溶液清洗后获得MoS2@Au NP‑DetProbe C1复合物;
(2)MoS2@Au NP‑DetProbe C2复合物的制备:按照步骤(1)的方法,将步骤②中的检测探针DetProbe C1替换为检测探针DetProbe C2,即可获得MoS2@Au NP‑DetProbeC 1复合物;
(3)将MoS2@Au NP‑DetProbe C1复合物和MoS2@Au NP‑DetProbe C2复合物喷涂在结合垫上;
(4)将T‑DNA溶液与链霉亲和素溶液混匀后于室温下培养,然后用超滤离心管离心,取内管中溶液固定在检测垫检测线处;将C‑DNA溶液与链霉亲和素溶液混匀后于室温下培养,然后用超滤离心管离心,取内管中溶液固定在检测垫控制线处;
(5)将样品垫、结合垫、检测垫和吸收垫顺次搭接在底板上,获得比色法试纸条。
3.根据权利要求2所述的比色法试纸条的制备方法,其特征在于:步骤①中,所述MoS2量子点溶液的制备方法为:用乙醇/水混合溶液将MoS2晶体粉末制备为MoS2分散液,经超声得到黑绿色悬浊液,然后离心,取上清液真空干燥,将干燥后的产物溶于水中,再离心取中间层溶液,过滤纯化后即得到MoS2量子点溶液;
和/或,所述步骤①中,MoS2量子点溶液的浓度为0.5‑5mg/mL;每毫升MoS2量子点溶液中需加入聚乙烯吡咯烷酮的量为0.005‑0.05g;
和/或,所述步骤①中,MoS2量子点溶液与聚乙烯吡咯烷酮的反应时间为0.5‑1.5h;
和/或,所述步骤①中,氯金酸溶液的浓度为20‑50mM;MoS2量子点溶液与氯金酸溶液的体积比为(50‑120):1;
和/或,所述步骤①中,氯金酸溶液加入后反应时间为5‑20min;
和/或,所述步骤②中,DetProbe C1溶液浓度为5‑20μM,三(2‑羧乙基)膦盐酸盐溶液浓度为0.5‑2mM,三磷酸腺嘌呤脱氧核苷酸溶液浓度为10‑20μM;
和/或,所述步骤②中,DetProbe C1溶液、三(2‑羧乙基)膦盐酸盐溶液、MoS2@Au纳米球溶液、三磷酸腺嘌呤脱氧核苷酸溶液的体积比为2:1:30:2;
和/或,所述步骤②中,冷藏温度为4℃;冷藏时间为2‑5h;
和/或,所述步骤②中,所述D‑PBSB溶液为5%BSA的D‑PBS缓冲液;
和/或,所述步骤(3)中,MoS2@Au NP‑DetProbe C1复合物和MoS2@Au NP‑DetProbe C2复合物分别分散在分散液中后再喷涂在结合垫上,所述分散液包括10%蔗糖、0.25%Tween‑
20、5%BSA和20mM Na3PO4·12H2O;MoS2@Au NP‑DetProbe C1复合物溶液和MoS2@Au NP‑DetProbe C2复合物溶液的浓度均为25‑60μM,用量均为0.5‑2mL;
和/或,所述步骤(4)中,T‑DNA溶液和C‑DNA溶液的浓度为5‑15μM,链霉亲和素溶液的浓度为1.5‑3mg/mL,T‑DNA溶液与链霉亲和素溶液、C‑DNA溶液与链霉亲和素溶液的体积比均为(5‑20):1;
和/或,所述步骤(4)中,培育时间为0.5‑1.5h。
4.一种用于检测新型冠状病毒SARS‑CoV‑2的比色法试纸条传感器,其特征在于:含有如权利要求1所述的比色法试纸条。
5.一种如权利要求1所述的比色法试纸条或如权利要求4所述的比色法试纸条传感器在检测新型冠状病毒SARS‑CoV‑2中的应用,所述应用为非疾病诊断或治疗目的。
6.一种用于检测新型冠状病毒SARS‑CoV‑2的荧光法试纸条,所述荧光法试纸条包括底板和沿层析方向依次设置在底板上的样品垫、结合垫、检测垫和吸收垫,所述检测垫上设有检测线和控制线,其特征在于:所述结合垫上喷涂有两种能与新型冠状病毒结合的纳米材料,第一种纳米材料为MoS2 QDs‑DetProbe F1,由检测探针DetProbe F1和MoS2量子点反应制得,第二种纳米材料为MoS2NSs‑BSA,由MoS2纳米片与牛血清蛋白偶联形成;
所述检测垫检测线处喷涂有链霉亲和素和检测探针DetProbe F2;所述检测垫控制线处喷涂有由第一种纳米材料MoS2 QDs‑DetProbe F1与牛血清蛋白偶联形成的DetProbeF1‑MoS2 QDs‑BSA;
所述检测探针DetProbe F1由羧基方式修饰,其碱基序列为:
5’‑carbox‑GCTGGATGTCGCTTACGACAATATTCCTTAGGGGCACCGCTACATTGACACATCCAGC‑3’;
和/或,所述检测探针DetProbe F2探针由生物素修饰,其碱基序列为:
5’‑biotin‑GCTGGATGTCACCGGATTGTCGGACATCGGATTGTCTGAGTCATATGACACATCCAGC‑3’。
7.一种如权利要求6所述的用于检测新型冠状病毒SARS‑CoV‑2的荧光法试纸条的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:(1)MoS2 QDs‑DetProbe F1‑BSA的制备:
①在MoS2量子点溶液中加入半胱氨酸,搅拌均匀后进行加热反应,反应结束后冷却至室温,将1‑(3‑二甲氨基丙基)‑3‑乙基碳二亚胺盐酸盐、N‑羟基琥珀酰亚胺加入MoS2量子点溶液中,搅拌反应,然后将活化的MoS2量子点溶液加入DetProbe F1溶液中,并用D‑PBS缓冲液调整溶液浓度,将复合物在室温下放置待其稳定,用超滤离心管离心,取内管中溶液,即得MoS2 QDs‑DetProbe F1复合物溶液;
②将MoS2 QDs‑DetProbe F1复合物溶液、1‑(3‑二甲氨基丙基)‑3‑乙基碳二亚胺盐酸盐、N‑羟基琥珀酰亚胺加入水中,避光搅拌反应,再加入BSA,继续避光搅拌反应,然后离心取沉淀,即得MoS2 QDs‑DetProbe F1‑BSA;
(2)MoS2 NSs‑BSA的制备:按照步骤(1)的方法,将步骤①中的MoS2量子点溶液替换为MoS2纳米片溶液,即可获得MoS2 NSs‑BSA;
(3)将MoS2 QDs‑DetProbe F1和MoS2 NSs‑BSA喷涂在结合垫上;
(4)将DetProbe F2溶液和链霉亲和素溶液混匀后于室温下培养,然后用超滤离心管离心,取内管中溶液固定在检测垫检测线处;将MoS2QDs‑DetProbe F1‑BSA喷涂在检测垫控制线处;
(5)将样品垫、结合垫、检测垫和吸收垫顺次搭接在底板上,获得荧光法试纸条。
8.根据权利要求7所述的荧光法试纸条的制备方法,其特征在于:所述步骤①中,所述MoS2量子点溶液的制备方法为:用乙醇/水混合溶液将MoS2晶体粉末制备为MoS2分散液,经超声得到黑绿色悬浊液,然后离心,取上清液真空干燥,将干燥后的产物溶于水中,再离心取中间层溶液,过滤纯化后即得到MoS2量子点溶液;
和/或,所述步骤①中,加热反应需在特氟龙容器中进行;
和/或,所述步骤①中,加热反应的温度为180‑300℃,加热反应的时间为20‑40min;
和/或,所述步骤①中,MoS2量子点溶液的浓度为0.5‑5mg/mL,每毫升MoS2量子点溶液中需加入的半胱氨酸为0.5‑5g;
和/或,所述步骤①中,1‑(3‑二甲氨基丙基)‑3‑乙基碳二亚胺盐酸盐、N‑羟基琥珀酰亚胺与MoS2量子点溶液的用量比为2.4:3.6:1(w/w/v);
和/或,所述步骤①中,MoS2 QDs溶液与DetProbe F1溶液的体积比为(5‑20):1;
和/或,所述步骤②中,MoS2 QDs‑DetProbe F1复合物、1‑(3‑二甲氨基丙基)‑3‑乙基碳二亚胺盐酸盐、N‑羟基琥珀酰亚胺、牛血清蛋白的用量比为50:7:4:10(v/w/w);
和/或,所述步骤②中,避光反应时间为10‑40min;
和/或,所述步骤(2)中,所述MoS2纳米片的制备方法为:用乙醇/水混合溶液将MoS2晶体粉末制备为MoS2分散液,经超声得到黑绿色悬浊液,然后离心,取上清液真空干燥,将干燥后的产物溶于水中,再离心取上清液,过滤纯化后即得到MoS2纳米片溶液;
和/或,步骤(3)中,MoS2 QDs‑DetProbe F1和MoS2 NSs‑BSA分别用D‑PBS缓冲液配制成溶液后再喷涂在结合垫上;MoS2 QDs‑DetProbe F1溶液和MoS2 NSs‑BSA溶液的浓度均为25‑
60μM,用量均为0.5‑2mL;
和/或,步骤(4)中,DetProbe F2溶液的浓度为5‑15μM,链霉亲和素溶液的浓度为1.5‑
3mg/mL;
和/或,步骤(4)中,DetProbe F2溶液与链霉亲和素溶液的体积比为(5‑20):1。
9.一种用于检测新型冠状病毒SARS‑CoV‑2的荧光法试纸条传感器,其特征在于:含有如权利要求6所述的荧光法试纸条。
10.一种如权利要求6所述的荧光法试纸条或如权利要求9所述的荧光法试纸条传感器在检测新型冠状病毒SARS‑CoV‑2中的应用,所述应用为非疾病诊断或治疗目的。