1.一种粪产碱杆菌青霉素G酰化酶的制备工艺，其特征在于，包括如下步骤：S1、取活化复壮后的粪产碱杆菌接种至盛装种子培养液的培养基中，37℃摇床培养15～20h后，得到种子液；

S2、取种子液加入发酵培养液中，37℃摇床发酵培养15h，且在前12h发酵时间内，每隔

1h滴加葡萄糖溶液，后3h发酵时间内，每隔1h滴加可溶性淀粉溶液，并保持发酵溶氧水平在

30～35％之间，控制发酵pH在7.5～8.0，得到发酵液，并进行酶活力测定；

S3、将S2中得到的发酵液先在低速下离心，得到湿重菌体，再取湿重菌体悬浮于pH8.0磷酸缓冲液中，再加入乙酸丁酯，得到粗提取溶液，再将粗提取溶液放在25℃、200～300r/min摇床中，分离提取24～36h，得到初步酶液；

S4、将S3中得到的初步酶液置于冰浴中5～10min，再于冰浴中，对初步酶液进行50W超声破碎10～30min，再将超声破碎后的初步酶液在0～4℃、10000～12000r/min条件下，离心

10～15min，上清液即为粗酶液；

S5、采用阴离子交换层析法，将S4中得到的粗酶液进一步提纯，得到纯酶；

所述发酵培养液的配置工艺，包括如下步骤：(1)、将0.06g硫酸镁、0.04g氯化钴、0.02g钼酸钠、0.02g氯化锌、0.01g硫酸铜、0.0005g硼酸以及0.02g硫酸铁溶于1000mL蒸馏水中，得到微量元素溶液，待用；

(2)、将20.0g磷酸二氢钾、50g磷酸氢二钾、70g磷酸氢二钠、12g硫酸铵、2.0g氯化铵、

1.0g氯化钠溶于1000蒸馏水中，得到基础盐溶液，待用；

(3)、将3.6g苯乙酰苯基丁氨酸放入1000mL 50mmol/L的磷酸缓冲液中，并调控其pH至

8.0，使得苯乙酰苯基丁氨酸完全溶于磷酸缓冲液中，得到20mmol/L苯乙酰苯基丁氨酸溶液，待用；

(4)、将0.9g NIPAB溶于1000mL 0.05mol/L的磷酸缓冲液中，得到NIPAB溶液，待用；

(5)、取1.0g柠檬酸钠、10.0g蛋白胨、5.0g酵母膏、100mL基础盐溶液、10mL微量元素溶液、5mL 20mmol/L步骤(3)中得到的苯乙酰苯基丁氨酸溶液、5mL步骤(4)中得到的NIPAB溶液以及5mL的消泡剂，并用蒸馏水补至1000mL，混合均匀后，得到未灭菌发酵培养液；

(6)、将未灭菌发酵培养液在121℃湿热灭菌20min，得到发酵培养液。

2.根据权利要求1所述的粪产碱杆菌青霉素G酰化酶的制备工艺，其特征在于，所述S1和S2中摇床转速均设置为200～300r/min。

3.根据权利要求1所述的粪产碱杆菌青霉素G酰化酶的制备工艺，其特征在于，所述种子培养液的配置工艺，包括如下步骤：

a、将5.0g酵母膏、1.0g蛋白胨、1.0g氯化钠溶于1000mL蒸馏水中，混合均匀后，并用

2mol/L NaOH调节pH至7.0～7.5，得到未灭菌种子培养液；

b、将未灭菌种子培养液在121℃湿热灭菌20min，得到种子培养液。

4.根据权利要求1所述的粪产碱杆菌青霉素G酰化酶的制备工艺，其特征在于，所述步骤S5中阴离子交换层析法提取纯酶包括如下步骤：A、将DEAESepharoseFF脱气4h以上，装柱，用50mmol/L pH7.8的磷酸缓冲液预平衡，再上样粗酶液，用平衡缓冲液洗脱至基线稳定，流出的即初酶液；

B、边搅拌，边向初酶液中加入固体硫酸铵至0.6mol/L，并且用0.6mol/L硫酸铵溶液预平衡Butyl‑SepharoseCL4B柱，硫酸铵溶液溶剂为50mmol/L、pH 7.8的磷酸缓冲液，再将含有0.6mol/L硫酸铵的初酶液上样到预平衡好的CL4B柱中，分步洗脱，当洗脱液中硫酸铵浓度降至0.2mol/L时，收集洗脱峰，并用超滤离心管脱盐，即得纯酶。

5.根据权利要求1所述的粪产碱杆菌青霉素G酰化酶的制备工艺，其特征在于，所述步骤2中酶活力测定包括如下步骤：

Ⅰ、取20μL发酵液，加入500μL pH 7.5的50mmol/L磷酸缓冲液中，在37℃保温10min，再加入37℃预热的1mL饱和的NIPAB溶液，反应4min，再加入1mL95％乙醇终止反应；

Ⅱ、取上述反应液，立即测定405nm吸光度，空白为不加酶的反应液。