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专利号: 2021110518680
申请人: 湖南农业大学
专利类型:发明专利
专利状态:无效专利
更新日期:2025-10-14
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种基于G4核酸适配体的检测生物分子的方法,其特征在于,包括如下步骤:(1)在反应溶剂I中,将生物分子的G4核酸适配体与钾离子进行混合反应,得到反应溶液I;

(2)将所述反应溶液I、氯化血红素和含有所述生物分子的待测物进行混合I,得到反应溶液II;

(3)将所述反应溶液II、过氧化氢和3,3’,5,5’‑四甲基联苯胺进行混合II,得到反应溶液III,观察所述反应溶液III的颜色变化并检测吸光值;

(4)激光照射所述反应溶液III,监测激光关闭后的温度变化。

2.根据权利要求1所述的基于G4核酸适配体的检测生物分子的方法,其特征在于,所述生物分子选自赭曲霉素A、腺嘌呤核苷三磷酸和凝血酶中的至少一种;所述赭曲霉素A的G4核酸适配体的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,所述腺嘌呤核苷三磷酸的G4核酸适配体的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示,所述凝血酶的G4核酸适配体的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。

3.根据权利要求1或2所述的基于G4核酸适配体的检测生物分子的方法,其特征在于,在步骤(1)中,所述G4核酸适配体和所述钾离子的摩尔比为1:5000‑15000。

4.根据权利要求3所述的基于G4核酸适配体的检测生物分子的方法,其特征在于,在步骤(1)中,所述G4核酸适配体的浓度为0.5‑2μM。

5.根据权利要求1或2所述的基于G4核酸适配体的检测生物分子的方法,其特征在于,在步骤(1)中,所述混合反应包括:将生物分子的G4核酸适配体与钾离子混合后,加热、冷却。

6.根据权利要求5所述的基于G4核酸适配体的检测生物分子的方法,其特征在于,所述加热的条件至少满足:温度为80‑95℃,时间为2‑8min。

7.根据权利要求1或2所述的基于G4核酸适配体的检测生物分子的方法,其特征在于,用于提供所述钾离子的钾源为氯化钾;所述反应溶剂I为水。

8.根据权利要求1或2所述的基于G4核酸适配体的检测生物分子的方法,其特征在于,在步骤(2)中,以1μmol的所述G4核酸适配体计,所述氯化血红素的添加量为0.8‑1.2μmol;

所述混合I的方法为:分别提供含有氯化血红素的溶液和含有生物分子的溶液,将所述含有氯化血红素的溶液、所述含有生物分子的溶液和所述反应溶液I混合。

9.根据权利要求1或2所述的基于G4核酸适配体的检测生物分子的方法,其特征在于,在步骤(3)中,以1μmol的所述G4核酸适配体计,所述过氧化氢的添加量为0.5‑2mmol,所述

3,3’,5,5’‑四甲基联苯胺的添加量为0.2‑0.6mmol;

所述混合II的方法为:分别提供含有过氧化氢的溶液和含有3,3’,5,5’‑四甲基联苯胺的溶液,将所述含有过氧化氢的溶液、所述含有3,3’,5,5’‑四甲基联苯胺的溶液和所述反应溶液II混合。

10.根据权利要求1或2所述的基于G4核酸适配体的检测生物分子的方法,其特征在于,在步骤(4)中,所述激光照射的条件至少满足:波长为780‑830nm,功率密度为1.7‑2.5W/2

cm,时间为15‑35s。