1.一种探针,其特征在于,包括:金纳米粒子-H1复合物、金纳米粒子-H2复合物和目标物识别复合物;
所述金纳米粒子-H1复合物和金纳米粒子-H2复合物分别由颈环DNA H1和H2与金纳米粒子结合而形成;
所述目标物识别复合物包括:用于识别miRNA的羧基磁性微球-DNA1/2复合物,和用于识别靶标分子的DNA3中的至少一种。
2.如权利要求1所述的探针,其特征在于,所述颈环DNA H1的序列如SEQ ID NO.1所示,H2的序列如SEQ ID NO.2所示。
3.如权利要求1或2所述的探针,其特征在于,所述miRNA为miR-203或miR-21;所述靶标分子为ATP、凝血酶、溶菌酶或表皮生长因子受体。
4.如权利要求3所述的探针,其特征在于,miRNA为miR-203时,所述探针中,DNA1的序列如SEQ ID NO.3所示,DNA2的序列如SEQ ID NO.4所示。
5.如权利要求3所述的探针,其特征在于,miRNA为miR-21时,所述探针中,DNA1的序列如SEQ ID NO.5所示,DNA2的序列如SEQ ID NO.6所示。
6.如权利要求3所述的探针,其特征在于,靶标分子为ATP时,DNA3的序列如SEQ ID NO.7所示。
7.权利要求1-6任一项所述的探针在检测miRNA和/或具有核酸适配体的靶标分子中的用途;或者在制备检测miRNA和/或具有核酸适配体的靶标分子的试剂盒中的用途。
8.权利要求1-6任一项所述的探针的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)金纳米粒子-H1复合物和金纳米粒子-H2复合物的制备:分别将H1和H2与金纳米粒子在缓冲液中进行孵育,反应5-7h;采用琼脂糖凝胶电泳进行分离,将分离的条带放入透析膜中透析,即得;
(2)羧基磁性微球-DNA1/2复合物的制备:将羧基修饰的磁珠进行活化处理,向活化后的磁珠中加入DNA1,反应3-5h,对所得复合物进行磁性分离,即得羧基磁性微球-DNA1复合物;再加入DNA2,反应1-3h,再进行磁性分离,即得羧基磁性微球-DNA1/2复合物。
9.如权利要求8所述的制备方法,其特征在于,步骤(1)中,所述金纳米粒子的制备方法为:在氯金酸和柠檬酸三钠混合液中加入冰的硼氢化钠,搅拌至溶液变成粉红色,反应2-
5h,即得;
优选的,氯金酸和柠檬酸三钠混合液中,氯金酸的浓度为0.25mM,柠檬酸三钠的浓度为
0.25mM,冰的硼氢化钠的浓度为0.1M。
10.一种利用权利要求1-6任一项所述的探针检测miRNA和/或具有核酸适配体的靶标分子的方法,其特征在于,步骤如下:(1)将目标物识别复合物分别与系列浓度梯度的待检测目标物溶液混合,反应,向反应后的溶液中加入金纳米粒子-H1复合物和金纳米粒子-H2复合物,孵育3-5h,测定孵育后溶液的紫外吸收光谱,构建待检测目标物浓度与紫外吸收峰值之间的工作曲线;
(2)提取待检测样品中的目标物,采用步骤(1)的方法,测得孵育后溶液的紫外吸收光谱,代入工作曲线,即得待检测样品中目标物的浓度。