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专利号: 2021108490598
申请人: 南通大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2025-11-18
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种利用自组装多肽制备水凝胶支架的方法,其中,所述方法包括:(1)将自组装肽序列通过共价键键合神经生长因子模拟肽,得到键合功能多肽;

(2)分离并培养巨噬细胞,并诱导其为“替代性激活”的抗炎M2巨噬细胞,得到细胞培养上清液并进行过滤,得到经过滤的细胞培养上清液;

(3)将所述经过滤的细胞培养上清液与所述键合功能多肽混合,得到混合液并调整所述混合液的浓度,所述键合功能多肽自组装形成水凝胶支架。

2.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述神经生长因子模拟肽具有促进神经血管细胞再生的功能。

3.如权利要求1或2所述的方法,其特征在于,所述自组装肽序列与神经生长因子模拟肽通过酰胺键或二硫键共价连接。

4.如权利要求1‑3中任一项所述的方法,其特征在于,所述自组装肽序列与神经生长因子模拟肽的摩尔比为(1 3):1。

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5.如权利要求1‑4中任一项所述的方法,其特征在于,所述巨噬细胞来自大鼠/小鼠腹腔或骨髓、或人外周血单个核淋巴细胞中的一种;

优选地,步骤(2)所述的培养在30℃~40℃、3%~10% CO2的条件下进行;进一步优选地,所述培养的过程包括:将所述巨噬细胞在培养基中生长至60% 80%的汇合度后,弃去培养液并~

利用PBS缓冲液进行洗涤,随后向洗涤后的培养物中加入新鲜培养基并继续培养36h以上、例如36 72h、优选40 50h;

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优选地,采用孔径为0.2 0.45μm的过滤材料对所述细胞培养上清液进行过滤。

~

6.如权利要求1‑5中任一项所述的方法,其特征在于,采用10ng/ml的 IL‑4进行步骤(2)所述的诱导。

7.如权利要求1‑6中任一项所述的方法,其特征在于,所述支架具有纳米纤维结构。

8.如权利要求1‑7中任一项所述的方法,其特征在于,所述支架具有水凝胶的形态,调节后凝胶的pH为6.9 7.2,浓度为0.5wt%‑4wt%。

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9.权利要求1‑8中任一项所述的方法制备的水凝胶支架在体外培养神经雪旺细胞中的用途,其特征在于,所述支架促进神经雪旺细胞的生长和活性。

10.权利要求1‑9中任一项所述的方法制备的多水凝胶支架在组织工程再生中的用途,其特征在于,所述支架促进损伤神经的再生。