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专利号: 2021108471205
申请人: 中国农业科学院植物保护研究所
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2025-10-14
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种检测番茄潜叶蛾乙酰胆碱酯酶A201S突变的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括检测番茄潜叶蛾乙酰胆碱酯酶A201S突变的特异性引物对和特异性探针,其中,所述特异性引物对由引物A201SF和A201SR组成,所述引物序列为:A201SF:5’ ‑TATTTTGGAGGTAACCCACACA‑3’,A201SR:5’ ‑ACAATGGAGACAGCAAATGAAG‑3’;

所述特异性探针由探针A201SpR和A201SpS组成,序列分别为:A201SpS:5’ ‑ TGAATCAGCCGGTGCA ‑3’;

A201SpR:5’ ‑ ‑TGGTGAATCATCTGGTGC ‑3’。

2.根据权利要求1所述的检测番茄潜叶蛾乙酰胆碱酯酶A201S突变的试剂盒,其特征在于,所述特异性探针A201SpR的5’端连接6‑FAM荧光基团,3’端连接MGB基团。

3.根据权利要求1所述的检测番茄潜叶蛾乙酰胆碱酯酶A201S突变的试剂盒,其特征在于,所述特异性探针A201SpS的5’端连接VIC荧光基团、3’端连接MGB基团。

4.一种检测番茄潜叶蛾乙酰胆碱酯酶A201S突变的基因型的方法,其特征在于,所述方法包括使用检测番茄潜叶蛾抗药性乙酰胆碱酯酶A201S突变的特异性引物对和特异性探针进行PCR扩增检测的步骤,所述特异性引物对由引物A201SF和A201SR组成,所述引物序列为:A201SF:5’ ‑TATTTTGGAGGTAACCCACACA‑3’,A201SR:5’ ‑ACAATGGAGACAGCAAATGAAG‑3’;

所述特异性探针由探针A201SpR和A201SpS组成,序列分别为:A201SpS:5’ ‑ TGAATCAGCCGGTGCA ‑3’;

A201SpR:5’ ‑ ‑TGGTGAATCATCTGGTGC ‑3’。

5.根据权利要求4所述的检测番茄潜叶蛾乙酰胆碱酯酶A201S突变的基因型的方法,其特征在于,将特异性探针A201SpS的5’端连接VIC荧光基团、3’端连接MGB基团;将特异性探针A201SpS的5’端连接VIC荧光基团、3’端连接MGB基团。

6.根据权利要求5所述的检测番茄潜叶蛾乙酰胆碱酯酶A201S突变的基因型的方法,其特征在于,若反应产物在仅FAM通道有信号在VIC通道无信号,则待测样本为含有突变位点A201S的纯合基因型;若反应产物在FAM通道有信号且在VIC通道也有信号,则待测样本为含有突变位点A201S的杂合基因型;若反应产物在FAM通道无信号且在VIC通道有信号,则待测样本为不含突变位点A201S的纯合基因型。

7.一种检测番茄潜叶蛾的杀虫剂抗性的方法,其特征在于,所述方法包括使用检测番茄潜叶蛾抗药性乙酰胆碱酯酶A201S突变的特异性引物对和特异性探针进行PCR扩增检测的步骤,所述特异性引物对由引物A201SF和A201SR组成,所述引物序列为:A201SF:5’ ‑TATTTTGGAGGTAACCCACACA‑3’,A201SR:5’ ‑ACAATGGAGACAGCAAATGAAG‑3’;

所述特异性探针由探针A201SpR和A201SpS组成,序列分别为:A201SpS:5’ ‑ TGAATCAGCCGGTGCA ‑3’;

A201SpR:5’ ‑ ‑TGGTGAATCATCTGGTGC ‑3’。

8.根据权利要求7所述的检测番茄潜叶蛾的杀虫剂抗性的方法,其特征在于,将特异性探针A201SpS的5’端连接VIC荧光基团、3’端连接MGB基团;将特异性探针A201SpS的5’端连接VIC荧光基团、3’端连接MGB基团。

9.根据权利要求7所述的检测番茄潜叶蛾的杀虫剂抗性的方法,其特征在于,所述杀虫剂为有机磷类杀虫剂或氨基甲酸酯类杀虫剂。

10.根据权利要求7所述的检测番茄潜叶蛾的杀虫剂抗性的方法,其特征在于,若反应产物在仅FAM通道有信号在VIC通道无信号,则待测样本为含有突变位点A201S的纯合基因型,待测样本具有杀虫剂抗性;

若反应产物在FAM通道有信号且在VIC通道也有信号,则待测样本为含有突变位点A201S的杂合基因型,待测样本具有杀虫剂抗性;

若反应产物在FAM通道无信号且在VIC通道有信号,则待测样本为不含突变位点A201S的纯合基因型,待测样本不具有杀虫剂抗性。