1.一种咪康唑手性中间体的生物合成方法,其特征在于所述的方法为:以土星轮头酵母ZJPH1807经发酵培养获得的湿菌体为酶源细胞,以2‑氯‑1‑(2,4‑二氯苯基)乙酮为底物,于pH 6.0~8.0的PBS缓冲液中构成转化体系,在20~45℃、200rpm条件下转化2~24h,反应结束后,即得含有所述咪康唑手性中间体的转化液;所述湿菌体的用量以PBS缓冲液的体积计为50~200g/L,所述底物的用量以PBS缓冲液的体积计为5~10g/L;
所述土星轮头酵母ZJPH1807保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号CCTCC NO:M2019215,保藏日期2019年3月29日,保藏地址:中国,武汉,武汉大学,邮编430072。
2.如权利要求1所述的咪康唑手性中间体的生物合成方法,其特征在于:所述PBS缓冲液的pH为7.2。
3.如权利要求1所述的咪康唑手性中间体的生物合成方法,其特征在于:所述的转化的条件为30℃,5~24h。
4.如权利要求1所述的咪康唑手性中间体的生物合成方法,其特征在于:所述湿菌体的用量以PBS缓冲液的体积计为80g/L。
5.如权利要求1所述的咪康唑手性中间体的生物合成方法,其特征在于:所述底物的用量以PBS缓冲液的体积计为5g/L。
6.如权利要求1所述的咪康唑手性中间体的生物合成方法,其特征在于:所述PBS缓冲液的浓度为0.1M。
7.如权利要求1所述的咪康唑手性中间体的生物合成方法,其特征在于:所述转化体系中还添加有辅助底物,所述辅助底物为下列之一:葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖、海藻糖、乙醇、甘油、异丙醇、1,2‑丙二醇;所述辅助底物的加入量以所述PBS缓冲液的体积计为50~
200g/L。
8.如权利要求7所述的咪康唑手性中间体的生物合成方法,其特征在于:所述辅助底物为葡萄糖、海藻糖或麦芽糖。
9.如权利要求8所述的咪康唑手性中间体的生物合成方法,其特征在于:所述辅助底物为麦芽糖,所述辅助底物的加入量以所述PBS缓冲液的体积计为150g/L。
10.如权利要求1所述的咪康唑手性中间体的生物合成方法,其特征在于所述酶源细胞按如下方法制备:(1)斜面培养:将土星轮头酵母ZJPH1807接种至斜面培养基,30℃培养
24h,获得斜面菌种;所述斜面培养基中各组分的终浓度组成为:葡萄糖15g/L,蛋白胨7.5g/L,酵母膏6g/L,(NH4)2SO4 3g/L,KH2PO41.5g/L,NaCl 0.75g/L,MgSO4·7H2O 0.75g/L,琼脂粉15~20g/L,溶剂为水,pH 6.5;
(2)种子培养:将步骤(1)所述的斜面菌种挑取一环菌体接种至种子培养基中,25~30℃、150~250rpm培养10~24h,获得种子液;所述种子培养基中各组分的终浓度组成为:葡萄糖15g/L,蛋白胨20g/L,酵母膏10g/L,(NH4)2SO4 2g/L,KH2PO4 2g/L,NaCll g/L,MgSO4·
7H2O 0.5g/L,溶剂为水,pH 6.5;
(3)发酵培养:将步骤(2)所述的种子液以体积浓度8%的接种量接种至发酵培养基中,
30℃、200rpm发酵培养32h,发酵结束后,将所得发酵液离心,所得沉淀用0.1M、pH7.5磷酸缓冲液洗涤,离心收集湿菌体,即为酶源细胞;所述发酵培养基中各组分的终浓度组成为:葡萄糖34.36g/L,酵母膏14.89g/L,NH4Cl 30.34g/L,KH2PO4 1.01g/L,CaCl2 0.11g/L,溶剂为水,pH 7.5。