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专利号: 2021106672799
申请人: 龙岩学院
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2025-12-30
缴费截止日期: 暂无
联系人

摘要:

权利要求书:

1.非洲猪瘟病毒LAMP检测引物组,该引物组可以检测非洲猪瘟病毒衣壳蛋白P72的编码基因,其特征在于,该引物组包括6条引物,6条引物的核苷酸序列分别如SEQ ID NO. 1‑ SEQ ID NO.6所示,具体如下所示:SEQ ID NO. 1 (P72‑F3):5′ ‑ggatactgagggaatagcaag‑3′SEQ ID NO. 2 (P72‑B3):5′ ‑gtgtagccataccaacccga‑3′SEQ ID NO. 3 (P72‑FIP): 5′ ‑ttacagctgtaatggacctcaaacttagcgcaacttaatccagagc‑3′

SEQ ID NO. 4 (P72‑BIP): 5′ ‑cattacgtcttatgtccagatacgttatccaaacagcaggtaaacaag‑3′

SEQ ID NO. 5 (P72‑LF): 5′ ‑ctaaatactatcagccccctc‑3′SEQ ID NO. 6 (P72‑LB): 5′ ‑tgcgtccgtgataggagtaat‑3′。

2.非洲猪瘟病毒LAMP检测试剂盒,其特征在于,所述的试剂盒包含权利要求1所述的引物组。

3.根据权利要求2所述的非洲猪瘟病毒LAMP检测试剂盒,其特征在于,所述的试剂盒还包含Bst DNA聚合酶、dNTP、MgSO4、Betaine、10X LAMP反应缓冲液、对反应结果起指示作用的指示剂或荧光染料。

4.根据权利要求3所述的非洲猪瘟病毒LAMP检测试剂盒,其特征在于,所述对反应结果起指示作用的指示剂或荧光染料为HNB、钙黄绿素、SYTO‑9、SYBR Green或Eva Green。

5.根据权利要求4所述的非洲猪瘟病毒LAMP检测试剂盒,其特征在于,所述试剂盒的各组分及其含量如下:引物组 2 μL,8 Units /μL Bst DNA聚合酶 2.4 μL、25 mM dNTP 3 μL、150 mM MgSO4 2 μL、5 M Betaine 10 μL、10X LAMP反应缓冲液 6 μL、3 mM HNB 2.4 μL、用去离子水补足到40 μL;

所述引物组中,各引物的摩尔浓度如下:P72‑F3和P72‑B3的摩尔浓度均为20 μM,P72‑FIP和P72‑BIP的摩尔浓度均为160 μM,P72‑LF和P72‑LB的摩尔浓度均为80 μM。

6.根据权利要求2所述的非洲猪瘟病毒LAMP检测试剂盒,其特征在于,所述试剂盒还包含阳性对照质粒。

7.根据权利要求2所述的非洲猪瘟病毒LAMP检测试剂盒,其特征在于,所述试剂盒的反应条件为:62 ℃, 75 min。