1.一种稳定表达猪圆环病毒2型ORF3蛋白细胞株的构建方法，其特征在于，包括如下步骤：

（1）PCV2 ORF3基因的扩增；

（2）将PCV2 ORF3基因与载体pLVZG‑CMV‑copGFP‑Puro双酶切后连接，构建重组慢病毒表达质粒pLVZG‑CMV‑ORF3‑copGFP‑Puro；

（3）将重组慢病毒表达质粒pLVZG‑CMV‑ORF3‑copGFP‑Puro与慢病毒包装质粒共转染

293T细胞，48 h后，收集细胞上清液，并根据细胞生长状况适当补充新鲜细胞培养基，72 h再次收集一次细胞上清液，将收集的细胞上清液用0.45 μm 滤器过滤，4℃储存；再将收集的细胞上清液离心，去除细胞碎片；然后收集上清液置于新的离心管中，加入适量慢病毒浓缩液，4°C沉淀4 h， 8000 × g ，离心30 min，去上清，PBS洗涤沉淀，最后加入5 mL PBS溶解；将溶解液加入预先消毒处理的超滤浓缩管中进一步浓缩和纯化，5000× g，离心15 min，获得小于1 mL的病毒浓缩液，用PBS补足至5 mL，再次离心置换缓冲液，此步骤重复3次，最后在病毒浓缩液中加入适量病毒稀释液稀释至1.2 mL；‑80°C冰箱保存，备用；

（4）将包装好的重组慢病毒转染PK‑15细胞，通过嘌呤霉素筛选阳性细胞株，对阳性细胞株进行细胞免疫荧光和qPCR鉴定，获得稳定表达PCV2 ORF3蛋白细胞株。

2.根据权利要求1所述一种稳定表达猪圆环病毒2型ORF3蛋白细胞株的构建方法，其特征在于：步骤（1）设计PCV2 ORF3‑F和PCV2 ORF3‑R为特异性引物，添加酶切位点NheI和BamHI，以感染PCV2的PK‑15细胞DNA为模板，进行PCR扩增； 特异性引物PCV2 ORF3‑F的序列见序列表SEQ ID 1，PCV2 ORF3‑R的序列见序列表SEQ ID 2。

3.根据权利要求4所述一种稳定表达猪圆环病毒2型ORF3蛋白细胞株的构建方法，其特征在于，PCR扩增体系为：模板 1 μL，Primer F(10 μM) 1 μL，Primer R(10 μM) 1 μL，PCR Mix（2×） 25 μL，ddH2O up to 50 μL；PCR反应程序：95℃预变性5 min，95℃变性30 s，55℃退火30s，72℃延伸45s，共循环35次，最后72℃再延伸10 min；PCR结束后，取10μL扩增产物在琼脂糖凝胶上电泳，分离、回收纯化。

4.根据权利要求1所述一种稳定表达猪圆环病毒2型ORF3蛋白细胞株的构建方法，其特征在于，步骤(2)中链接体系为：目的基因 13 μL，载体DNA 4 μL，T4 DNA Ligase 1 μL，10×T4 DNA Ligase Buffer 2 μL，16℃连接过夜。

5.根据权利要求1所述一种稳定表达猪圆环病毒2型ORF3蛋白细胞株的构建方法，其特征在于：步骤(3)中，所述的慢病毒包装质粒是pMDLg/pRRE，pRSV‑Rev，pMD2.G。

6.根据权利要求1所述一种稳定表达猪圆环病毒2型ORF3蛋白细胞株的构建方法，其特征在于：步骤(3)中，所述的病毒稀释液是DMEM培养液。

7.根据权利要求1所述一种稳定表达猪圆环病毒2型ORF3蛋白细胞株的构建方法，其特征在于：步骤(4)中qPCR鉴定的引物为特异性检测引物ORF3‑F、ORF3‑R以及特异性检测引物GAPDH‑F、GAPDH‑R，所述特异性检测引物ORF3‑F和ORF3‑R的序列见序列表SEQ ID 4和SEQ ID 5，特异性检测引物GAPDH‑F和GAPDH‑R的序列见序列表SEQ ID 6和SEQ ID 7。

8.根据权利要求1‑7任一项所述的方法得到的细胞株在PCV2 ORF3蛋白功能检测中的应用。