1.一种将家蚕素斑品种定向转育成茶斑限性系统的雌连续回交法,其特征在于,该方法包括如下步骤:
(1)用普斑限性品种的雌 与基础普茶品种的雄(ZZ +p/+p L/L)杂交,得F1代;
L
(2)F1代雌雄各有1种基因型(雌: 雄:ZZ p/+p + /L)和各1种表现型(雌:深普茶斑、雄:普茶斑),将其混合育至上蔟结茧,削茧鉴蛹后留雌L L L
汰雄(ZZ p/+p + /L),用雌与轮回亲本素斑品种雄(ZZ p/p +/+)杂交,得F2代;
(3)F2代有
L L L L L L
ZZ p/p +/+ 、ZZ +p/p +/+、ZZ +p/p L/+和ZZ p/p L/+ 8种基因型,有普斑、深普斑、深普茶斑、素斑、普茶斑和姬茶斑6种表现型,混合育至4龄后,淘汰非茶斑(不分颜色深浅,有深普斑、普斑和素斑)个体,仅选留茶斑(不分颜色深浅,包括深普茶斑、普茶斑和姬茶斑)继续饲养至上蔟结茧,削茧鉴蛹后留雌( 和L L L L L
p/p L/+)汰雄(ZZ +p/p L/+和ZZ p/p L/+),用雌与轮回亲本素斑品种雄(ZZ p/p + /+)回交,得BC1代;
(4)将BC1代单蛾育至4龄后,依据蛾区内的表现型数量分为蛾区1型和蛾区2型,其中蛾区1型有普茶斑、姬茶斑、普斑和素斑4种表现型,蛾区2型有深普茶斑、普茶斑、姬茶斑、深普斑、普斑和素斑等6种表现型,将蛾区2型整区淘汰,选留蛾区1型,并将蛾区1型中的非茶斑(包括普斑和素斑)个体淘汰,茶斑(包括普茶斑和姬茶斑)个体饲养至上蔟结茧,削茧鉴蛹L L
后留雌 汰雄(ZZ p/p +/L),用雌与轮回亲本素斑品种雄(ZZ p/p + /L
+)回交,得BC2代;
L L L
(5)BC2代有 ZZ p/p + /+ 和ZZ p/p +/L
4种基因型,有普斑、普茶斑、素斑和姬茶斑4种表现型,将其混合育至4龄后,淘汰非茶斑(包括普斑和素斑)个体,茶斑(包括普茶斑和姬茶斑)个体继续饲养至上蔟结茧,削茧鉴蛹留雌L L L
汰雄(ZZ p/p + /L),用雌与轮回亲本素斑品种雄(ZZ p/p + /+)回交得BC3代;
(6)BC3代后按步骤(5)操作,混合育至4龄后,淘汰非茶斑(包括普斑和素斑)个体,茶斑(包括普茶斑和姬茶斑)个体继续饲养至上蔟结茧,削茧鉴蛹留雌 汰L L
雄(ZZ p/p +/L),用雌与轮回亲本素斑品种雄(ZZ p/p +/L)连续回交n(n≥5)次得BCn代;
(7)将BCn代混合育至4龄后,淘汰非茶斑(包括普斑和素斑)个体,茶斑(包括普茶斑和姬茶斑)个体继续饲养至上蔟结茧,其中普茶斑为雌 姬茶斑为雄(ZZ L
p/p +/L),通过削茧鉴蛹将雌雄分开,用雌与雄自交得S1代;
L
(8)S1代有 ZZ p/p+ /L L
+、ZZp/p+/L和ZZp/p L/L 6种基因型,有普斑、普茶斑、素斑和姬茶斑4种表现型,混合饲育至4龄后,依然淘汰非茶斑(包括普斑和素斑)个体,茶斑(包括普茶斑和姬茶斑)个体继续饲养至上蔟结茧 ,削茧鉴蛹将雌雄分开 ,雌的基因型 为 和L
雄的基因型为ZZ p/p +/L和ZZ p/p L/L,雌与雄自交得到S2代;
(9)S2代有2种基因型(用类型1表示)、4种基因型(用类型2表示)和6种基因型(用类型3表示)等基因型数量不同的蛾区,将S2代单蛾育至4龄后,将出现非茶斑(包括普斑和素斑)的蛾区(即类型3)整区淘汰,将仅有普茶斑和姬茶斑两种表现型的蛾区(包括类型1和类型
2)随机编号后继续饲养至上蔟结茧,削茧将雌雄分开,进行蛾区内雌雄自交得S3代;
(10)S3代按步骤(9)的编号进行多蛾区混合育(饲育区),将出现非茶斑(包括普斑和素斑)的饲育区整区淘汰(即类型2的自交后代),选留仅有普茶斑和姬茶斑的饲育区(即类型1的自交后代),即转育得到能在家蚕幼虫发育至3龄时准确鉴别雌雄的茶斑限性系统。