1.一种新型冠状病毒中和抗体酶联免疫法检测试剂盒，由设在盒体内的包被有RBD蛋白的微孔板、作为阳性对照的RBD中和抗体标准品溶液、阴性对照、样品稀释液、重组ACE2蛋白酶结合物、20×浓缩洗涤液、显示液A、显示液B、终止液和说明书构成；

其特征在于：

所述微孔板为聚苯乙烯微孔板，且其各孔包被有浓度为5‑10μg/ml的重组RBD蛋白；

所述RBD中和抗体标准品溶液为：样品稀释液稀释的浓度为2000ng/ml的RBD中和抗体溶液；

所述阴性对照为正常人新冠病毒SARS‑CoV‑2抗体阴性血清；

所述样品稀释液的配方是：除菌的1000mL纯水中，含NaCl 8g、NaH2PO4·2H2O 0.2g、Na2HPO4·12H2O 2.9g、CTAB 1g、BSA5g、TritonX‑100 0.1mL、Proclin300 1mL，pH 7.4；

所述重组ACE2蛋白酶结合物是辣根过氧化物酶标记的重组ACE2；该酶标ACE2酶结合物工作效价为1:5000，稀释液为酶结合物稀释液；

所述20×浓缩洗涤液的配方是：除菌的50mL双蒸水中，含NaCl 8.0g、NaH2PO4·

2H2O0.2g、Na2HPO4·12H2 O 2.9g、吐温20 0.5mL；

所述显示液A是浓度为0.3mg/mL的四甲基联苯胺TMB溶液；所述显示液B是浓度为

0.74mg/mL的过氧化脲溶液；使用时将显示液A与显示液B按体积比1﹕1混合；

所述终止液是浓度为2mol/L的硫酸溶液；

所述微孔板的包被方法是：

1.1)配制包被液：即配制碳酸盐缓冲溶液，并调整pH值为9.6；

Na2CO3 1.59g

NaHCO3 2.94g

纯化水定容至1000mL

过滤除菌，4℃保存；

1.2)配制洗涤液，洗涤液的配方及制法是：

过滤除菌，4℃保存；

1.3)配制封闭液，封闭液的配方及制法是：

过滤除菌，4℃保存；

1.4)用包被液将重组RBD蛋白稀释至工作浓度5‑10μg/mL，混匀，并静置15分钟；

1.5)取标记好的微孔板，用8孔道排枪点板，使抗体液达到150μL/孔，盖上盖板膜；

1.6)置于2℃‑8℃冰箱，包被4‑6小时，然后，每孔加入5μL 0.1％SDS水溶液，过夜包被

12‑16小时；

1.7)取出包被板，室温平衡30min，甩掉抗体液，吸水纸拍干，每孔每次加300μL洗涤液，洗涤2次，吸水纸拍干；

1.8)每孔加入250μL封闭液，2℃‑8℃过夜封闭16小时；

1.9)取出包被板，室温平衡30min，甩掉封闭液，吸水纸拍干；放在硅胶干燥器中干燥，在室温条件下，湿度30％以下保持5小时；

1.10)以铝箔袋真空包装包被板，做好标记，2‑8℃保存，备用；

所述RBD蛋白是利用CHO细胞表达的新型冠状病毒SARS‑CoV‑2全长RBD的重组蛋白；所述ACE2蛋白是利用CHO细胞表达的新型冠状病毒SARS‑CoV‑2全长ACE2与BSA融合的重组蛋白，其中为保证ACE2的活性，ACE2在重组蛋白的N端；所述的RBD中和抗体是用来自于测定的新冠康复患者中和抗体可变区序列并与人源化Fc融合，通过CHO细胞重组表达形成的；

所述酶结合物稀释液的配方是：除菌的1000mL纯水中，含NaCl 8g、NaH2PO4·2H2O 

0.2g、Na2HPO4·12H2O 2.9g、BSA5g、Proclin300 1mL；

显色液的配制方法是以二甲基亚砜DMSO为溶剂配制浓度为0.3mg/mL的四甲基联苯胺TMB溶液，命名为A液，以pH5.5、0.2mol/L磷酸氢二钠与0.1mol/L柠檬酸缓冲液为溶剂配制浓度为0.74mg/mL的过氧化脲溶液，命名为B液，使用时将A液与B液按体积比1﹕1混合。