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专利号: 2021100304187
申请人: 南京师范大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2025-08-18
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.合成番茄红素的酿酒酵母基因工程菌的构建方法,其特征在于,包括如下步骤:(1)将连接了组成型强启动子PTDH3的crtI基因连接到酵母表达质粒中,得到pESC‑CI重组质粒;

(2)将组成型强启动子PTDH3、crtE基因、终止子TCYC1、组成型强启动子PTDH3、以及crtB基因依次连接,得到重组片段Ⅲ,然后将重组片段Ⅲ连接到pESC‑CI重组质粒中,得到pCIETB重组质粒;

(3)将步骤(2)得到的重组质粒pCIETB转化酿酒酵母菌,得到合成番茄红素的酿酒酵母基因工程菌;

所述的crtE的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示;

所述的crtB的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示;

所述的crtI的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示;

步骤(1)中,所述的表达质粒为pESC‑LEU;

步骤(2)中,所述终止子TCYC1的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示;

步骤(2)中,所述强启动子PTDH3的核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示;

步骤(3)中,所述的酿酒酵母菌为酿酒酵母BY4741。

2.权利要求1所述合成番茄红素的酿酒酵母基因工程菌的构建方法构建得到的合成番茄红素的酿酒酵母基因工程菌。

3.权利要求2所述合成番茄红素的酿酒酵母基因工程菌在发酵制备番茄红素中的应用。

4.根据权利要求3所述的应用,其特征在于,以SD‑Leu培养基的发酵培养基,以权利要求1所述的合成番茄红素的酿酒酵母基因工程菌为发酵菌株,发酵制备番茄红素。

5.根据权利要求4所述的应用,其特征在于,在培养基中加入脂肪酸,所述的脂肪酸为棕榈油酸、油酸、亚油酸、亚麻酸中的一种或几种的混合物。

6. 根据权利要求4所述的应用,其特征在于,所述SD‑Leu培养基的配方为:20g/L蛋白胨,20 g/L葡萄糖,0.69g/L CSM‑Leu;

所述发酵的发酵温度为28℃、发酵时间为36h。