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专利号: 2020114096274
申请人: 上海海洋大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2026-06-16
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种快速检测乙型肝炎病毒前S2抗原的磁性免疫层析试纸条,其特征在于,包括黏性底板及其上依次粘附搭接的样品垫(1)、结合垫(2)、硝酸纤维素膜(3)、吸水垫(4);

所述的硝酸纤维素膜(3)上包被检测线(5)和质控线(6);所述的检测线为乙型肝炎病毒肝前S2抗原‑牛血清白蛋白偶联物,所述的质控线为鼠IgG。

2.权利要求1所述的快速检测乙型肝炎病毒前S2抗原的磁性免疫层析试纸条,其特征在于,乙型肝炎病毒前S2抗原‑牛血清白蛋白偶联物是将合成的乙肝前S2抗原多肽与牛血清白蛋白用双功能偶联剂4‑(N‑马来酰亚胺基甲基)环己烷‑1‑羧酸琥珀酰亚胺酯将BSA上的氨基和乙型肝炎病毒前S2抗原多肽上的巯基相连接的偶联物。

3.权利要求2所述的快速检测乙型肝炎病毒前S2抗原的磁性免疫层析试纸条,其特征在于,所述的乙肝前S2抗原多肽的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示:SEQ ID No.1:CMQWN STAFH QALQD PRVRG LYFPA GG。

4.一种快速检测乙型肝炎病毒前S2抗原的方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)预孵育:将一抗及免疫磁珠与待测样品充分混匀后静置1‑30分钟;所述的一抗为乙型肝炎病毒前S2特异性单克隆抗体;所述的免疫磁珠是指偶联了羊抗鼠二抗的超顺磁性纳米颗粒;

(2)预孵育后的溶液与层析液充分混匀5‑60秒,滴加到权利要求1‑3任一项所述至磁性免疫层析试纸条的样品垫;

(3)定性或定量判断结果。

5.根据权利要求4所述的检测方法,其特征在于,步骤(1)所述的免疫磁珠制备方法为,用碳二亚胺和N‑羟基琥珀酰亚胺将超顺磁性纳米颗粒与羊抗鼠二抗共价连接。

6.根据权利要求4或5所述的检测方法,其特征在于,所述的超顺磁性纳米颗粒的粒径为100‑300nm。

7.根据权利要求4所述的检测方法,其特征在于,步骤(2)所述的层析液是含5%‑20%BSA和1%‑5%吐温‑20的BS缓冲液。

8.根据权利要求4所述的检测方法,其特征在于,步骤(3)的定性判断结果方法为:比较样品与阴性对照检测线的颜色深度判定阴阳性结果,若样品检测线的颜色接近或深于阴性对照则为阴性结果,检测线颜色浅于阴性对照或者没有显色则为阳性结果。

9.根据权利要求4所述的检测方法,其特征在于,步骤(3)的定量判断结果方法为仪器定量测定,使用磁信号分析仪测定检测线和质控线上结合的磁珠含量,并计算两者比值T/C,根据样品与阴性对照间T/C的比值B/B0建立标准曲线,由此计算出样品中乙肝前S2抗原的含量。

10.一种快速检测乙型肝炎病毒前S2抗原的试剂盒,其特征在于,包括权利要求1‑3任一项所述的磁性免疫层析试纸条和免疫磁珠,所述的免疫磁珠是指偶联了羊抗鼠二抗的超顺磁性纳米颗粒。