1.一种非疾病的诊断和治疗目的多种呼吸道病毒的实时荧光定量PCR检测方法,其特征在于,分别在第一PCR管、第二PCR管及第三PCR管中加入样本核酸进行荧光PCR反应,根据荧光定量PCR曲线判读检测结果;其中,所述第一PCR管的检测体系中含有分别针对甲型流感病毒、乙型流感病毒和呼吸道合胞病毒的引物对和探针,所述第二PCR管的检测体系中含有分别针对副流感病毒1型、副流感病毒2型和副流感病毒3型的引物对和探针,所述第三PCR管的检测体系中含有分别针对腺病毒、肺炎支原体和肺炎衣原体的引物对和探针;针对所述甲型流感病毒、乙型流感病毒、呼吸道合胞病毒、副流感病毒1型、副流感病毒2型、副流感病毒3型、肺炎支原体、肺炎衣原体和腺病毒的引物对的序列分别如SEQ ID NO.1 2、4 5、~ ~
7 8、10 11、13 14、16 17、19 20、22 23和25 26所示,针对所述甲型流感病毒、乙型流感病~ ~ ~ ~ ~ ~ ~毒、呼吸道合胞病毒、副流感病毒1型、副流感病毒2型、副流感病毒3型、肺炎支原体、肺炎衣原体和腺病毒的探针的序列分别如SEQ ID NO.3、6、9、12、15、18、21、24和27所示;其中,SEQ ID NO.1 2所示的序列为针对H1N1、H3N2两种分型甲流的通用引物,SEQ ID NO.7 8所示的~ ~序列为针对呼吸道合胞病毒的A/B两种分型的通用引物,SEQ ID NO. 25 26所示的序列为~
针对腺病毒的3/7两种分型的通用引物;
所述第一PCR管中,甲型流感病毒的探针上标记有VIC荧光基团,乙型流感病毒的探针上标记有CY5荧光基团,呼吸道合胞病毒的探针上标记有FAM荧光基团;
所述第二PCR管中,副流感病毒1型的探针上标记有CY5荧光基团,副流感病毒2型的探针上标记有VIC荧光基团,副流感病毒3型的探针上标记有FAM荧光基团;
所述第三PCR管中,腺病毒的探针上标记有CY5荧光基团,肺炎支原体的探针上标记有VIC荧光基团,肺炎衣原体的探针上标记有FAM荧光基团。
2.根据权利要求1所述的实时荧光定量PCR检测方法,其特征在于:所述第一PCR管、第二PCR管及第三PCR管的检测体系中还分别含有内参基因,所述内参基因的引物对和探针的序列分别如SEQ ID NO.28 30所示。
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3.根据权利要求1所述的实时荧光定量PCR检测方法,其特征在于:所述第一PCR管的检测体系中含有三个测序引物对,其序列分别如SEQ ID NO.31 36所示;所述第二PCR管的检~测体系中含有三个测序引物对,其序列分别如SEQ ID NO.37 42所示;所述第三PCR管的检~
测体系中含有三个测序引物对,其序列分别如SEQ ID NO.43 48所示。
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4.一种多种呼吸道病毒的实时荧光定量PCR检测试剂盒,其特征在于:包括第一组引物、第二组引物和第三组引物;所述第一组引物包括分别针对甲型流感病毒、乙型流感病毒和呼吸道合胞病毒的引物对,所述第二组引物包括分别针对副流感病毒1型、副流感病毒2型和副流感病毒3型的引物对,所述第三组引物包括分别针对腺病毒、肺炎支原体和肺炎衣原体的引物对;针对所述甲型流感病毒、乙型流感病毒、呼吸道合胞病毒、副流感病毒1型、副流感病毒2型、副流感病毒3型、肺炎支原体、肺炎衣原体和腺病毒的引物对的序列分别如SEQ ID NO.1 2、4 5、7 8、10 11、13 14、16 17、19 20、22 23和25 26所示;其中,SEQ ID ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~NO.1 2所示的序列为针对H1N1、H3N2两种分型甲流的通用引物,SEQ ID NO.7 8所示的序列~ ~为针对呼吸道合胞病毒的A/B两种分型的通用引物,SEQ ID NO. 25 26所示的序列为针对~
腺病毒的3/7两种分型的通用引物;
所述实时荧光定量PCR检测试剂盒还包括第一组探针、第二组探针和第三组探针;所述第一组探针包括分别针对甲型流感病毒、乙型流感病毒和呼吸道合胞病毒的探针,所述第二组探针包括分别针对副流感病毒1型、副流感病毒2型和副流感病毒3型的探针,所述第三组探针包括分别针对腺病毒、肺炎支原体和肺炎衣原体的探针;针对所述甲型流感病毒、乙型流感病毒、呼吸道合胞病毒、副流感病毒1型、副流感病毒2型、副流感病毒3型、肺炎支原体、肺炎衣原体和腺病毒的探针的序列分别如SEQ ID NO.3、6、9、12、15、18、21、24和27所示;所述第一组探针中,甲型流感病毒的探针上标记有VIC荧光基团,乙型流感病毒的探针上标记有CY5荧光基团,呼吸道合胞病毒的探针上标记有FAM荧光基团;所述第二组探针中,副流感病毒1型的探针上标记有CY5荧光基团,副流感病毒2型的探针上标记有VIC荧光基团,副流感病毒3型的探针上标记有FAM荧光基团;所述第三组探针中,腺病毒的探针上标记有CY5荧光基团,肺炎支原体的探针上标记有VIC荧光基团,肺炎衣原体的探针上标记有FAM荧光基团。
5.根据权利要求4所述的实时荧光定量PCR检测试剂盒,其特征在于:所述第一组引物、第二组引物和第三组引物还分别包括内参基因的引物对,所述内参基因的引物对如SEQ ID NO.28 29所示。
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6.根据权利要求4所述的实时荧光定量PCR检测试剂盒,其特征在于:所述第一组探针、第二组探针和第三组探针还分别包括内参基因的探针,所述内参基因的探针的序列如SEQ ID NO.30所示。