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专利号: 2020110121224
申请人: 南昌大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2025-10-27
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种利用水稻osa‑miR5511基因提高水稻产量的方法,其特征在于,所述方法为通过基因工程技术对水稻osa‑miR5511基因进行敲除或抑制其表达,所述水稻osa‑miR5511基因的成熟序列如SEQ ID NO.1所示,其发夹结构序列如SEQ ID NO.2所示。

2.根据权利要求1所述的一种利用水稻osa‑miR5511基因提高水稻产量的方法,其特征在于,所述基因工程技术为CRISPR基因编辑技术。

3.根据权利要求2所述的一种利用水稻osa‑miR5511基因提高水稻产量的方法,其特征在于,通过CRISPR基因编辑技术对水稻osa‑miR5511基因进行敲除或抑制其表达,包括以下步骤:

1)osa‑miR5511的CRISPR敲除表达载体构建:利用CRISPR敲除靶点引物对、水稻U6a启动子和pYLCRISPR/Cas9质粒,经酶切、连接、转化大肠杆菌感受态细胞、阳性菌落PCR检测与测序分析,获得osa‑miR5511的CRISPR敲除表达载体;

2)osa‑miR5511缺失表达高产水稻植株的获得:将上述构建osa‑miR5511的CRISPR敲除表达载体,经Ti质粒、植物病毒载体、显微注射、原生质体或DNA直接转化水稻愈伤组织/细胞,再培养成转基因水稻植株,并利用PCR、测序分析、qRT‑PCR、Northern‑blot方法鉴定获得osa‑miR5511缺失表达的转基因水稻,经在大田中与野生型水稻一起种植,于成熟期进行考种比较分析,确定获得osa‑miR5511缺失表达的高产水稻植株。

4.水稻osa‑miR5511基因在提高水稻产量中的应用,其特征在于,抑制水稻osa‑miR5511基因的表达,选育水稻产量提高的水稻品种。