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专利号: 2020109865642
申请人: 湖南农业大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2025-10-14
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种淮山多糖的提取方法,其特征在于,包括如下步骤:(1)将淮山和尿素‑氯化胆碱低共熔溶剂混合,加热提取,冷却后分离出提取液;

(2)将步骤(1)所得提取液与酶混合进行酶解,将酶解产物进行固液分离,得到滤液;

所述酶为α‑淀粉酶、普鲁兰酶和糖化酶,所述酶解过程包括:S1向步骤(1)得到的提取液中加入α‑淀粉酶水溶液,酶解得到一级酶解液;

S2向一级酶解液中加入普鲁兰酶水溶液,酶解得到二级酶解液;

S3向二级酶解液中加入糖化酶水溶液,酶解得到三级酶解液;

(3)醇沉步骤(2)得到的滤液并洗涤,得到粗淮山多糖沉淀;

其中,所述尿素‑氯化胆碱低共熔溶剂中尿素和氯化胆碱的摩尔比为4‑6:1,所述尿素‑氯化胆碱低共熔溶剂的含水量为18‑25wt%。

2.根据权利要求1所述的淮山多糖的提取方法,其特征在于,所述步骤(1)中,以1g淮山为基准,尿素‑氯化胆碱低共熔溶剂的用量为30‑50mL;

所述淮山为粉状,粒径为178‑250微米。

3.根据权利要求2所述的淮山多糖的提取方法,其特征在于,所述混合过程采用超声混合,所述超声功率为100‑200W,所述超声时间为20‑40min;

所述加热提取采用水浴加热提取,所述水浴加热温度为80‑100℃,时间为40‑60 min。

4.根据权利要求1‑3中任一项所述的淮山多糖的提取方法,其特征在于,所述α‑淀粉酶水溶液的浓度为120‑150U/mL,以提取液的体积为基准,所述α‑淀粉酶水溶液的添加量为2‑

2.5%;

所述普鲁兰酶水溶液的浓度为200‑250U/mL,以提取液的体积为基准,所述普鲁兰酶水溶液的添加量为1.5‑2%;

所述糖化酶水溶液的浓度为2500‑3000U/mL,以提取液的体积为基准,所述糖化酶水溶液的添加量为1‑1.5%。

5.根据权利要求4所述的淮山多糖的提取方法,其特征在于,所述步骤S1中,酶解温度为50‑52℃,酶解时间为40‑60min;

所述步骤S2中,酶解温度为55‑57℃,酶解时间为50‑60min;

所述步骤S3中,酶解温度为55‑57℃,酶解时间为50‑60min。

6.根据权利要求4所述的淮山多糖的提取方法,其特征在于,所述步骤(3)中,醇沉的方法包括:向滤液中加入乙醇,并在2‑8℃条件下静置10‑15h;所述洗涤过程中采用的洗涤液为乙醇和/或丙酮。

7.根据权利要求4所述的淮山多糖的提取方法,其特征在于,所述洗涤的方法为离心洗涤,离心速度为2800‑3200r/min,离心时间为5‑10min,洗涤次数为2‑4次。

8.根据权利要求4所述的淮山多糖的提取方法,其特征在于,所述提取方法还包括纯化粗淮山多糖的步骤,所述步骤包括:加水溶解步骤(3)得到的粗淮山多糖沉淀并洗涤,收集上层清液,去蛋白质,干燥;

其中,所述洗涤的方法为离心洗涤,离心速度为2800‑3200r/min,离心时间为5‑10min,洗涤次数为2‑4次;

去蛋白质的方法包括:浓缩上层清液,得到浓缩液Ⅰ,加入sevag试剂,震荡后分液,收集上层液,重复次数使得上层液中蛋白质的含量不高于1%。

9.根据权利要求8所述的淮山多糖的提取方法,其特征在于,所述sevag试剂为氯仿和正丁醇的混合溶液;

所述氯仿和所述正丁醇的体积比为4‑6:1;

所述浓缩液Ⅰ与sevag试剂的体积比为3‑5:1;

所述震荡时间为30‑40min。

10.根据权利要求8或9所述的淮山多糖的提取方法,其特征在于,溶解过程中,水与粗淮山多糖沉淀的质量比为15‑25:1;

所述干燥的方法为真空冷冻干燥。

11.根据权利要求10所述的淮山多糖的提取方法,其特征在于,在真空冷冻干燥前,还包括浓缩所述去蛋白质的上层液,使其为原体积的50%‑75%。