利索能及
我要发布
收藏
专利号: 2020109470915
申请人: 湖南农业大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2025-10-14
缴费截止日期: 暂无
联系人

摘要:

权利要求书:

1.一种双酶介导级联信号放大的氨苄西林检测适体传感器,其特征在于,该传感器由以下步骤制备得到:A.特定DNA的生成:如SEQ ID No:1所示的生物素标记的AMP核酸适配体、如SEQ ID No:

2所示的载体DNA1及如SEQ ID No:3所示的杂交链式反应HCR引发链DNA杂交形成双链DNA检测探针;于双链DNA检测探针中加入梯度浓度的氨苄西林标准品,在T4 DNA连接酶和核酸外切酶III的辅助下得到APH链;

B.特定DNA的捕获及HCR反应:将上述APH链加入到链霉亲和素包被的聚苯乙烯微孔板中,使APH链被捕获到微孔板中作为HCR引发链;于微孔板中加入发夹DNA1和发夹DNA2,由HCR引发链将发夹DNA1和发夹DNA2交叉打开,最后加入荧光染料SYBR Green I指示剂,根据不同的荧光强度建立氨苄西林检测标准曲线。

2.如权利要求1所述一种双酶介导级联信号放大的氨苄西林检测适体传感器,其特征在于,所述AMP核酸适配体、载体DNA1及杂交链式反应HCR引发链DNA的浓度和体积相同。

3.如权利要求1所述一种双酶介导级联信号放大的氨苄西林检测适体传感器,其特征在于,所述氨苄西林标准品溶液的梯度浓度为10-18-10-10 g/mL。

4.如权利要求1所述一种双酶介导级联信号放大的氨苄西林检测适体传感器,其特征在于,所述发夹DNA1序列如SEQ ID No:4所示。

5.如权利要求1所述一种双酶介导级联信号放大的氨苄西林检测适体传感器,其特征在于,所述发夹DNA2序列如SEQ ID No:5所示。

6.如权利要求1所述一种双酶介导级联信号放大的氨苄西林检测适体传感器,其特征在于,所述T4 DNA连接酶和核酸外切酶III的辅助作用时间均为20-40min。

7.如权利要求1所述一种双酶介导级联信号放大的氨苄西林检测适体传感器,其特征在于,所述荧光强度检测时激发波长为490 nm,发射波长为520 nm。