1.一种免疫原性组合物,其特征在于:所述免疫原性组合物为免疫原性组合物A或免疫原性组合物B;
所述免疫原性组合物A的活性成分为由弓形虫的重组蛋白14-3-3、弓形虫的重组蛋白MIF和弓形虫的重组蛋白CDPK3组成;
所述免疫原性组合物B的活性成分为由所述弓形虫的重组蛋白14-3-3和所述弓形虫的重组蛋白CDPK3组成;
所述弓形虫的重组蛋白14-3-3是如下A1)、A2)、A3)或A4)的蛋白质:A1)氨基酸序列是序列表中序列1的蛋白质,
A2)氨基酸序列是序列表中序列1的第37-302位的蛋白质,A3)在A1)或A2)所示的蛋白质的羧基端或/和氨基端融合蛋白标签得到的融合蛋白,A4)将序列表中序列1所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的且具有相同功能的由A1)或A2)衍生的或与A1)或A2)所示的蛋白质具有
80%以上的同一性的蛋白质;
所述弓形虫重组蛋白MIF是如下B1)、B2)、B3)或B4)的蛋白质:B1)氨基酸序列是序列表中序列3的蛋白质,
B2)氨基酸序列是序列表中序列3的第35-150位的蛋白质,B3)在B1)或B2)的N末端或/和C末端连接蛋白标签得到的融合蛋白质,B4)将序列表中序列3所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的且具有相同功能的由B1)或B2)衍生的或与B1)或B2)所示的蛋白质具有
80%以上的同一性的蛋白质;
所述弓形虫重组蛋白TgCDPK3蛋白是如下C1)、C2)、C3)或C4)的蛋白质:C1)氨基酸序列是序列表中序列5的蛋白质,
C2)氨基酸序列是序列表中序列5的第35-571位的蛋白质,C3)在C1)或C2)的N末端或/和C末端连接蛋白标签得到的融合蛋白质,C4)将序列表中序列5所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的且具有相同功能的由C1)或C2)衍生的或与C1)或C2)所示的蛋白质具有
80%以上的同一性的蛋白质。
2.根据权利要求1所述的免疫原性组合物,其特征在于:所述免疫原性组合物A中,所述弓形虫的重组蛋白14-3-3、弓形虫的重组蛋白MIF和弓形虫的重组蛋白CDPK3的质量比为1:
1:1;
所述免疫原性组合物B中,所述弓形虫的重组蛋白14-3-3和弓形虫的重组蛋白CDPK3的质量比为1:1。
3.根据权利要求1或2所述的免疫原性组合物,其特征在于:所述免疫原性组合物为下述任一种产品:F1、治疗和/或预防和/或辅助治疗弓形虫感染的产品;
F2、提高弓形虫感染后宿主免疫应答能力的产品;
F3、降低弓形虫感染引起的宿主致死率的产品;
F4、减少弓形虫感染导致的宿主脑包囊产生的产品。
4.根据权利要求3所述的免疫原性组合物,其特征在于:所述治疗和/或预防和/或辅助治疗弓形虫感染的产品为用于弓形虫感染预防的疫苗,所述用于弓形虫感染预防的疫苗含有佐剂。
5.权利要求1-4中任一权利要求所述的免疫原性组合物的制备方法,包含如下步骤:制备所述弓形虫的重组蛋白14-3-3、所述弓形虫的重组蛋白MIF和所述弓形虫的重组蛋白CDPK3,将所述弓形虫的重组蛋白14-3-3、所述弓形虫的重组蛋白MIF和所述弓形虫的重组蛋白CDPK3混合作为所述免疫原性组合物的活性成分,得到所述的免疫原性组合物;
所述弓形虫的重组蛋白14-3-3按照包括如下步骤的方法制备:使所述弓形虫的重组蛋白14-3-3的编码基因在原核微生物中进行表达得到所述弓形虫的重组蛋白14-3-3;
所述弓形虫的重组蛋白MIF按照包括如下步骤的方法制备:使所述弓形虫的重组蛋白MIF的编码基因在原核微生物中进行表达得到所述弓形虫的重组蛋白MIF;
所述弓形虫的重组蛋白CDPK3按照包括如下步骤的方法制备:使所述弓形虫的重组蛋白CDPK3的编码基因在原核微生物中进行表达得到所述弓形虫的重组蛋白CDPK3。
6.根据权利要求5所述的方法,其特征在于:所述弓形虫的重组蛋白14-3-3的编码基因为如下a1)、a2)或a3)所示的基因:a1)编码链的编码序列是序列2所示的DNA分子;
a2)编码链的编码序列是序列2的第109-909位所示的DNA分子;
a3)与a1)或a2)限定的DNA分子具有80%以上的同一性且编码所述弓形虫的重组蛋白
14-3-3;
所述弓形虫的重组蛋白MIF的编码基因为如下b1)、b2)或b3)所示的基因:b1)编码链的编码序列是序列4所示的DNA分子;
b2)编码链的编码序列是序列4的第103-453位所示的DNA分子;
b3)与b1)或b2)限定的DNA分子具有80%以上的同一性且编码所述弓形虫的重组蛋白MIF;
所述弓形虫的重组蛋白CDPK3的编码基因为如下c1)、c2)或c3)所示的基因:c1)编码链的编码序列是序列6所示的DNA分子;
c2)编码链的编码序列是序列6的第103-1716位所示的DNA分子;
c3)与c1)或c2)限定的DNA分子具有80%以上的同一性且编码所述弓形虫的重组蛋白CDPK3。
7.根据权利要求5所述的方法,其特征在于:使所述弓形虫的重组蛋白14-3-3的编码基因在原核微生物中进行表达包括将所述弓形虫的重组蛋白14-3-3的编码基因导入受体大肠杆菌,得到表达所述弓形虫的重组蛋白14-3-3的重组大肠杆菌,培养所述重组大肠杆菌,表达得到所述弓形虫的重组蛋白14-3-3;
使所述弓形虫的重组蛋白MIF的编码基因在原核微生物中进行表达包括将所述弓形虫的重组蛋白MIF的编码基因导入受体大肠杆菌,得到表达所述弓形虫的重组蛋白MIF的重组大肠杆菌,培养所述重组大肠杆菌,表达得到所述弓形虫的重组蛋白MIF;
使所述弓形虫的重组蛋白CDPK3的编码基因在原核微生物中进行表达包括将所述弓形虫的重组蛋白CDPK3的编码基因导入受体大肠杆菌,得到表达所述弓形虫的重组蛋白CDPK3的重组大肠杆菌,培养所述重组大肠杆菌,表达得到所述弓形虫的重组蛋白CDPK3。
8.根据权利要求7所述的方法,其特征在于:表达所述弓形虫的重组蛋白14-3-3的重组大肠杆菌为将pET-28a-Tg14-3-3导入大肠杆菌BL21(DE3)得到的表达氨基酸序列是序列1的所述弓形虫的重组蛋白14-3-3的重组微生物,所述重组微生物命名为BL21(DE3)/pET-
28a-Tg14-3-3,所述pET-28a-Tg14-3-3为将载体pET-28a(+)的EcoR I和Xho I识别位点间的小片段替换为序列2第109-909位所示的DNA片段得到的重组载体;
表达所述弓形虫的重组蛋白MIF的重组大肠杆菌为将pET-28a-TgMIF导入大肠杆菌BL21(DE3)得到的表达氨基酸序列是序列3的所述弓形虫的重组蛋白MIF的重组微生物,所述重组微生物命名为BL21(DE3)/pET-28a-TgMIF,所述pET-28a-TgMIF为将载体pET-28a(+)的BamH I和Xho I识别位点间的小片段替换为序列4第103-453位所示的DNA片段得到的重组载体;
表达所述弓形虫的重组蛋白CDPK3的重组大肠杆菌为将pET-28a-TgCDPK3导入大肠杆菌BL21(DE3)得到的表达氨基酸序列是序列5的所述弓形虫的重组蛋白CDPK3的重组微生物,所述重组微生物命名为BL21(DE3)/pET-28a-TgCDPK3,所述pET-28a-TgCDPK3为将载体pET-28a(+)的BamH I和Xho I识别位点间的小片段替换为序列6第103-1716位所示的DNA片段得到的重组载体。
9.权利要求1-4中任一权利要求所述免疫原性组合物中的弓形虫蛋白相关的生物材料,其特征在于:所述生物材料为下述任一种:H1)编码权利要求1中所述弓形虫重组蛋白14-3-3、MIF和/或CDPK3的核酸分子;
H2)含有H1)所述核酸分子的表达盒;
H3)含有H1)所述核酸分子的重组载体、或含有H2)所述表达盒的重组载体;
H4)含有H1)所述核酸分子的重组微生物、或含有H2)所述表达盒的重组微生物、或含有H3)所述重组载体的重组微生物;
H5)含有H1)所述核酸分子的重组细胞系、或含有H2)所述表达盒的重组细胞系;
H6)含有H1)所述核酸分子的转基因动物组织、或含有H2)所述表达盒的转基因动物组织;
H7)含有H1)所述核酸分子的宿主细胞、或含有H2)所述表达盒的宿主细胞。
10.权利要求1-4中任一权利要求所述的弓形虫的重组蛋白14-3-3、弓形虫的重组蛋白MIF和/或弓形虫的重组蛋白CDPK3。