利索能及
我要发布
收藏
专利号: 2020108358689
申请人: 安徽医科大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2025-10-14
缴费截止日期: 暂无
联系人

摘要:

权利要求书:

1.一种免疫原性组合物,其特征在于:所述免疫原性组合物为免疫原性组合物A或免疫原性组合物B;

所述免疫原性组合物A的活性成分为由弓形虫的重组蛋白14‑3‑3、弓形虫的重组蛋白MIF和弓形虫的重组蛋白CDPK3组成;

所述免疫原性组合物B的活性成分为由所述弓形虫的重组蛋白14‑3‑3和所述弓形虫的重组蛋白CDPK3组成;

所述弓形虫的重组蛋白14‑3‑3是如下A1)或A2)的蛋白质:

A1)氨基酸序列是序列表中序列1的蛋白质,

A2)氨基酸序列是序列表中序列1的第37‑302位的蛋白质;

所述弓形虫重组蛋白MIF是如下B1)或B2)的蛋白质:

B1)氨基酸序列是序列表中序列3的蛋白质,

B2)氨基酸序列是序列表中序列3的第35‑150位的蛋白质;

所述弓形虫重组蛋白TgCDPK3蛋白是如下C1)或C2)的蛋白质:C1)氨基酸序列是序列表中序列5的蛋白质,

C2)氨基酸序列是序列表中序列5的第35‑571位的蛋白质;所述免疫原性组合物A中,所述弓形虫的重组蛋白14‑3‑3、弓形虫的重组蛋白MIF和弓形虫的重组蛋白CDPK3的质量比为

1:1:1;

所述免疫原性组合物B中,所述弓形虫的重组蛋白14‑3‑3和弓形虫的重组蛋白CDPK3的质量比为1:1。

2.根据权利要求1所述的免疫原性组合物,其特征在于:所述免疫原性组合物为下述任一种产品:F1、治疗和/或预防和/或辅助治疗弓形虫感染的产品;

F2、提高弓形虫感染后宿主免疫应答能力的产品;

F3、降低弓形虫感染引起的宿主致死率的产品;

F4、减少弓形虫感染导致的宿主脑包囊产生的产品。

3.根据权利要求2所述的免疫原性组合物,其特征在于:所述治疗和/或预防和/或辅助治疗弓形虫感染的产品为用于弓形虫感染预防的疫苗,所述用于弓形虫感染预防的疫苗含有佐剂。

4.权利要求1‑3中任一权利要求所述的免疫原性组合物的制备方法,包含如下步骤:制备所述弓形虫的重组蛋白14‑3‑3、所述弓形虫的重组蛋白MIF和所述弓形虫的重组蛋白CDPK3,将所述弓形虫的重组蛋白14‑3‑3、所述弓形虫的重组蛋白MIF和所述弓形虫的重组蛋白CDPK3混合作为所述免疫原性组合物的活性成分,得到所述的免疫原性组合物;

所述弓形虫的重组蛋白14‑3‑3按照包括如下步骤的方法制备:使所述弓形虫的重组蛋白14‑3‑3的编码基因在原核微生物中进行表达得到所述弓形虫的重组蛋白14‑3‑3;

所述弓形虫的重组蛋白MIF按照包括如下步骤的方法制备:使所述弓形虫的重组蛋白MIF的编码基因在原核微生物中进行表达得到所述弓形虫的重组蛋白MIF;

所述弓形虫的重组蛋白CDPK3按照包括如下步骤的方法制备:使所述弓形虫的重组蛋白CDPK3的编码基因在原核微生物中进行表达得到所述弓形虫的重组蛋白CDPK3。

5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于:所述弓形虫的重组蛋白14‑3‑3的编码基因为如下a1)或a2)所示的基因:a1)编码链的编码序列是序列2所示的DNA分子;

a2)编码链的编码序列是序列2的第109‑909位所示的DNA分子;

所述弓形虫的重组蛋白MIF的编码基因为如下b1)或b2)所示的基因:b1)编码链的编码序列是序列4所示的DNA分子;

b2)编码链的编码序列是序列4的第103‑453位所示的DNA分子;

所述弓形虫的重组蛋白CDPK3的编码基因为如下c1)或c2)所示的基因:c1)编码链的编码序列是序列6所示的DNA分子;

c2)编码链的编码序列是序列6的第103‑1716位所示的DNA分子。

6.根据权利要求4所述的方法,其特征在于:使所述弓形虫的重组蛋白14‑3‑3的编码基因在原核微生物中进行表达包括将所述弓形虫的重组蛋白14‑3‑3的编码基因导入受体大肠杆菌,得到表达所述弓形虫的重组蛋白14‑3‑3的重组大肠杆菌,培养所述重组大肠杆菌,表达得到所述弓形虫的重组蛋白14‑3‑3;

使所述弓形虫的重组蛋白MIF的编码基因在原核微生物中进行表达包括将所述弓形虫的重组蛋白MIF的编码基因导入受体大肠杆菌,得到表达所述弓形虫的重组蛋白MIF的重组大肠杆菌,培养所述重组大肠杆菌,表达得到所述弓形虫的重组蛋白MIF;

使所述弓形虫的重组蛋白CDPK3的编码基因在原核微生物中进行表达包括将所述弓形虫的重组蛋白CDPK3的编码基因导入受体大肠杆菌,得到表达所述弓形虫的重组蛋白CDPK3的重组大肠杆菌,培养所述重组大肠杆菌,表达得到所述弓形虫的重组蛋白CDPK3。

7.根据权利要求6所述的方法,其特征在于:表达所述弓形虫的重组蛋白14‑3‑3的重组大肠杆菌为将pET‑28a‑Tg14‑3‑3导入大肠杆菌BL21(DE3)得到的表达氨基酸序列是序列1的所述弓形虫的重组蛋白14‑3‑3的重组微生物,所述重组微生物命名为BL21(DE3)/pET‑

28a‑Tg14‑3‑3,所述pET‑28a‑Tg14‑3‑3为将载体pET‑28a(+)的EcoR I和Xho I识别位点间的小片段替换为序列2第109‑909位所示的DNA片段得到的重组载体;

表达所述弓形虫的重组蛋白MIF的重组大肠杆菌为将pET‑28a‑TgMIF导入大肠杆菌BL21(DE3)得到的表达氨基酸序列是序列3的所述弓形虫的重组蛋白MIF的重组微生物,所述重组微生物命名为BL21(DE3)/pET‑28a‑TgMIF,所述pET‑28a‑TgMIF为将载体pET‑28a(+)的BamH I和Xho I识别位点间的小片段替换为序列4第103‑453位所示的DNA片段得到的重组载体;

表达所述弓形虫的重组蛋白CDPK3的重组大肠杆菌为将pET‑28a‑TgCDPK3导入大肠杆菌BL21(DE3)得到的表达氨基酸序列是序列5的所述弓形虫的重组蛋白CDPK3的重组微生物,所述重组微生物命名为BL21(DE3)/pET‑28a‑TgCDPK3,所述pET‑28a‑TgCDPK3为将载体pET‑28a(+)的BamH I和Xho I识别位点间的小片段替换为序列6第103‑1716位所示的DNA片段得到的重组载体。