1.一种二氧化锰基纳米药物载体的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)人血清蛋白与叶酸的有效连接HSA‑FA的制备:将叶酸预溶于二甲亚砜中,超声条件下充分溶解;37 ℃条件下加入1‑(3‑二甲氨基丙基)‑3‑乙基碳二亚胺盐酸盐、N‑羟基琥珀酰亚胺以及三乙胺,避光搅拌反应20分钟以获得FA‑NHS中间体;将100 mg人血清蛋白溶于
20 mL去离子水,使用0.2 M氢氧化钠溶液将pH值调至10;搅拌下将人血清蛋白溶液逐渐滴入FA‑NHS溶液中,避光反应;获得的溶液被装入12000 M透析袋,在0.1 M氢氧化钠溶液中预先透析,之后转入去离子水中透析,透析结束后样品经冷冻干燥后得到;
(2)生物矿化法制备纳米二氧化锰MnO2‑HSA‑FA:20~80 mg HSA‑FA溶于10 mL去离子水,超声溶解后加入MnCl2溶液;将混合液搅拌20分钟以实现人血清蛋白对于锰离子的充分包裹,继而向溶液中逐滴加入1 M氢氧化钠溶液将混合液pH值调至10 11,室温下敞口反应1 3~ ~小时;获得的产物在12000 M透析袋中经去离子水透析24小时,经冷冻干燥后获得;
(3)葡萄糖氧化酶以及L‑精氨酸的共负载:取上述步骤中获得的MnO2‑HSA‑FA 固体溶于
10 mL去离子水并超声溶解;向MnO2‑HSA‑FA中加入L‑Arg完全溶解后黑暗下搅拌24小时以实现充分的吸附;之后继续向溶液中加入GOX,完全溶解后暗黑条件下搅拌24小时;所得的混合液经过高速离心,洗涤,冷冻,真空干燥获得MnO2‑HSA‑FA+GOX+L‑Arg固体。
2.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,步骤(1)中所述的人血清蛋白与叶酸、NHS、EDC‑HCl的质量比为1∶0.1 0.8∶0.2 1.6∶0.2 1.6,每20 mL二甲亚砜中加入叶酸的质~ ~ ~量为10~80 mg,加入三乙胺100‑400 μL。
3.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,步骤(1)中所述的FA‑NHS与HSA的反应时长为12 48小时。
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4.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述步骤(2)中氯化锰与HSA‑FA的质量比为1∶0.3~1.3,MnCl2溶液的浓度为0.1 M。
5.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述步骤(3)中MnO2‑HSA‑FA、GOX,L‑Arg的质量比为1∶0.1 0.5∶0.1 0.4。
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6.一种权利要求1所述的纳米药物载体在制备抗癌药物中的应用。