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专利号: 2020106580453
申请人: 新乡医学院
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2025-12-08
缴费截止日期: 暂无
联系人

摘要:

权利要求书:

1.一种重组HTLV‑1 Env表达质粒pSRHS‑Tat‑EnvHTLV‑1的构建方法,其特征在于,包括以下步骤:利用滚环PCR技术将质粒pSRHS‑Tat‑EnvHIV‑1 CRF07中HIV‑1 Env中对应的gp145片段后面第一个氨基酸残基突变成终止密码子,获得突变体;用HTLV‑1 Env全长片段替换所述突变体的HIV‑1 Env基因的gp145片段,获得重组HTLV‑1 Env表达质粒pSRHS‑Tat‑EnvHTLV‑1;获得重组HTLV‑1 Env表达质粒pSRHS‑Tat‑EnvHTLV‑1后转化至Top10感受态细胞中;

所述HTLV‑1 Env片段核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示;所述gp145片段的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示;

所述滚环PCR技术涉及的点突变引物序列见SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.3所示;

滚环PCR法点突变反应体系:

滚环PCR法点突变反应条件:

2.一种按照权利1所述的重组HTLV‑1 Env表达质粒pSRHS‑Tat‑EnvHTLV‑1的构建方法构建的质粒pSRHS‑Tat‑EnvHTLV‑1。

3.如权利要求2所述的质粒pSRHS‑Tat‑EnvHTLV‑1在HTLV‑1 Env介导的细胞‑细胞融合体系中的应用。

4.如权利要求2所述的质粒pSRHS‑Tat‑EnvHTLV‑1在针对HTLV‑1病毒的进入抑制剂筛选和/或验证方面的应用,该应用仅用于非疾病治疗及诊断目的。

5.一种HTLV‑1 Env介导的细胞‑细胞融合体系,其特征在于,包括:效应细胞COS‑1,权利要求2所述的质粒pSRHS‑Tat‑EnvHTLV‑1以及靶细胞TZM‑bl。

6.如权利要求5所述的HTLV‑1 Env介导的细胞‑细胞融合体系在针对HTLV‑1病毒的进入抑制剂筛选和/或验证方面的应用,该应用仅用于非疾病治疗及诊断目的。