1.一种从鮰鱼鱼骨中提取硫酸软骨素的方法,其特征在于:包括,
称取鮰鱼鱼骨粉,加入NaOH溶液于50℃水浴中恒温浸泡6h,并间歇搅拌,过滤,收集滤液,取滤渣用同样的方法处理一次,过滤,合并两次滤液,得碱提滤液;
将碱提滤液pH值调至6.8~7.0,再加入占碱提滤液质量百分比为1~1.2%的胃蛋白酶,50~60℃条件下反应2~3h,制得粗酶解液,灭酶处理得酶解液;
将灭活的酶解液pH值调至6.4~6.6,加入活性炭,搅拌吸附1~2h,静置后过滤,弃滤渣,得吸附滤液;
向吸附滤液中加入占吸附滤液质量百分比为10~12%的蛋白沉淀剂,搅拌、离心,弃沉淀,得鱼骨浸提液;
取鱼骨浸提液,加入占鱼骨浸提液质量百分数4%-4.5%的无水乙酸钠,搅拌,用NaOH溶液调节pH至5.8~6.2,加入乙醇,搅拌,4℃静置12h,离心后弃上清液,取沉淀在60~70℃条件下干燥,得硫酸软骨素。
2.如权利要求1所述从鮰鱼鱼骨中提取硫酸软骨素的方法,其特征在于:所述鮰鱼鱼骨粉,其制备方法为:将鮰鱼鱼骨于80~100℃水中煮1h,除去残留的肌肉、脂肪和其它结缔组织,80℃烘干3.5h,粉碎至60目,采用3倍体积的丙酮浸泡两次,每次1h,回收丙酮后,再加入
2倍体积的乙醚浸泡1h后,回收乙醚,自然晾干,即得鱼骨粉。
3.如权利要求1所述从鮰鱼鱼骨中提取硫酸软骨素的方法,其特征在于:所述称取鮰鱼鱼骨粉,加入NaOH溶液于50℃水浴中恒温浸泡6h,其中,所述NaOH溶液的浓度为1mol/L,NaOH溶液与鮰鱼鱼骨粉体积质量比以mL:g计为6:1。
4.如权利要求1所述从鮰鱼鱼骨中提取硫酸软骨素的方法,其特征在于:所述间歇搅拌,搅拌速率为每隔10min搅拌一次,搅拌转速为60r/min,每次搅拌时间为1min。
5.如权利要求1所述从鮰鱼鱼骨中提取硫酸软骨素的方法,其特征在于:所述胃蛋白酶,其酶活为474U/mg。
6.如权利要求1所述从鮰鱼鱼骨中提取硫酸软骨素的方法,其特征在于:所述灭酶处理得酶解液,其中,灭酶处理温度为90℃,灭酶处理时间为10min,用冷水迅速降至室温。
7.如权利要求1所述从鮰鱼鱼骨中提取硫酸软骨素的方法,其特征在于:所述加入活性炭,搅拌吸附1~2h,静置后过滤,其中,活性炭的加入量为清液体积的5~6%,搅拌转速为
60~80r/min,静置时间为0.5~1h。
8.如权利要求1所述从鮰鱼鱼骨中提取硫酸软骨素的方法,其特征在于:所述向吸附滤液中加入占吸附滤液质量10%的蛋白沉淀剂,搅拌、离心,其中,蛋白沉淀剂为三氯乙酸,搅拌转速为60~80r/min,时间为1~2min,离心转速为5000r/min,离心时间为20min。
9.如权利要求1所述从鮰鱼鱼骨中提取硫酸软骨素的方法,其特征在于:所述加入乙醇,搅拌,其中,乙醇浓度为80~90Wt%的乙醇,搅拌转速为40~60r/min,时间为1~3min。
10.如权利要求1所述从鮰鱼鱼骨中提取硫酸软骨素的方法,其特征在于:所述离心后弃上清液,取沉淀在60~70℃条件下干燥,其中,离心转速为5000r/min,离心时间为20min。