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专利号: 2020104806192
申请人: 湖南农业大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2025-10-14
缴费截止日期: 暂无
联系人

摘要:

权利要求书:

1. 一种与辣椒果实角质层合成基因连锁的分子标记,其特征在于,为辣椒基因组12号染色体上200104484bp位置处发生的G向A的突变,所述的分子标记的引物包括两条正向引物和一条反向引物,正向引物X:CTTAGAAGGAGAGGCTGACAAGTG正向引物Y:CTTAGAAGGAGAGGCTGACAAGTA;

反向引物:CGCTGACGAGAACTAGACATCTG;

所述的分子标记对应的基因型:G:G为具有果实角质层的基因型、A:G为具有果实角质层的基因型、A:A为不具有果实角质层的基因型。

2.根据权利要求1所述的分子标记,其特征在于:两条正向引物分别连接不同的荧光接头序列为:FAM:GAAGGTGACCAAGTTCATGCT;

HEX:GAAGGTCGGAGTCAACGGATT。

3.权利要求1‑2任一项所述的分子标记的应用,其特征在于:用于鉴定和辅助筛选果实角质层缺乏型辣椒。

4.根据权利要求3所述的应用,其特征在于:用于果实角质层缺乏型辣椒突变体育种。

5.根据权利要求4所述的应用,其特征在于:采用PCR反应进行检测。

6.根据权利要求5所述的应用,其特征在于:具体包括以下步骤:(1)以待测样品基因组DNA为模板,利用分子标记的扩增引物进行Touc‑hdown PCR扩增,获得扩增产物;

(2)对扩增产物进行检测与分析。

7.根据权利要求6所述的应用,其特征在于:对扩增产物进行荧光检测时,若是G:G基因型,则判定为果实表面具有角质层的野生纯合单株;若是A:A基因型,则判定为果实表面不具有角质层的突变纯合单株;若是A:G基因型,则判定为果实表面具有角质层的杂合单株。

8.根据权利要求7所述的应用,采用Touchdown PCR;

Touchdown PCR扩增程序为:94℃15min;95℃20s;65℃‑56℃60s,10个循环,每个循环退火延伸温度降0.8℃;94℃20s;57℃60s,26个循环。