1.一种具有免疫调节功能的林蛙油多糖组分,其特征在于:所述的林蛙油多糖组分属于糖‑蛋白复合物,包含总糖含量为80.87 ± 1.17%、糖醛酸含量为10.19 ± 0.43%、蛋白含量为6.42 ± 0.16%;
所述的林蛙油多糖组分属于杂多糖,按摩尔比计算,其包含的甘露糖:氨基葡萄糖:半乳糖醛酸:半乳糖:岩藻糖=1: 2.28: 2.40: 3.00: 2.23;所述的林蛙油多糖组分属于多分散多糖,其重均分子量为999.586 kDa、数均分子量为244.366 kDa、多分散指数为4.09;所述的林蛙油多糖组分属于吡喃糖,连接方式包括α‑和/或β‑构型的糖苷键;
所述的具有免疫调节功能的林蛙油多糖组分的制备方法,包含如下步骤:
1)粗多糖的提取
称取10 g 林蛙油脱脂粉末,以100: 1的液料比在蒸馏水中浸泡12 h后均质,调节pH至
6.8,加入林蛙油脱脂粉末0.2%w/w的木瓜蛋白酶于37℃孵育2 h;沸水浴中灭酶10 min,冷却、离心取上清液,调节pH至7.0,浓缩体积至1/4后加入3倍体积量的95V%乙醇水溶液,于4℃静置12 h;离心收集沉淀,冷冻干燥后得林蛙油粗多糖,得率5.09 ± 0.21%、总糖含量
23.08 ± 1.56%;
2)粗多糖的纯化
采用Sevag试剂脱蛋白3次,除去残留的Sevag试剂后透析3次;透析液冷冻干燥后得林蛙油纯化多糖,总糖含量55.42 ± 1.21%;
3)多糖组分的分离
称取100 mg林蛙油纯化多糖溶于20 mL 去离子水中,上样至二乙氨基乙基纤维素‑52色谱柱;用去离子水、0. 1 mol/L 0.5mol/L的NaCl 溶液依次进行梯度洗脱,流速1 mL/~
min、每管5 mL;苯酚‑硫酸法检测波长490 nm 的吸光度,绘制洗脱曲线;根据洗脱曲线的指示,选择性收集峰面积最大的主峰所对应的洗脱液,即合并0.3 mol/L NaCl 溶液所对应的洗脱液;用去离子水对洗脱液透析3次;冷冻干燥得所述的林蛙油多糖组分。
2.一种权利要求1所述的具有免疫调节功能的林蛙油多糖组分的用途,其特征在于:用于制备抗氧化与增强机体免疫力的功能产品。
3.根据权利要求2所述的用途,其特征在于:所述功能产品为片剂、胶囊、口服液的制剂。
4.根据权利要求3所述的用途,其特征在于:所述片剂的制备方法为:取3 g权利要求1所述的具有免疫调节功能的林蛙油多糖组分与200 mg聚乙烯吡咯烷酮、1.8 mg磷酸氢钙混合,研细,过100 目筛;搅拌时加入5%wt聚维酮K30的95%乙醇溶液制软材,湿法制粒过16目筛;60℃干燥,过筛,整粒,加入整粒后总重量的1%wt的硬脂酸镁和2%wt的微粉硅胶,混合均匀,压片即得。
5.根据权利要求3所述的用途,其特征在于:所述胶囊剂的制备方法为:取3 g过40目筛的权利要求1所述的具有免疫调节功能的林蛙油多糖组分,按重量比1: 1 比例喷入90%V乙醇水溶液,混合均匀,加入过40目筛后的林蛙油多糖组分的10%wt的淀粉制软材,过20目筛制粒,置于60℃烘箱中干燥50 min,再过20目筛整粒,在相对湿度低于63% 的环境下装填于
3号空胶囊中,即得。
6.根据权利要求3所述的用途,其特征在于:所述口服液的制备方法为:取3 g权利要求
1所述的具有免疫调节功能的林蛙油多糖组分加入100 mL 纯化水中,室温搅拌至溶解,加入木糖醇0.5 g,山梨酸钾0.2 g,搅拌均匀后,罐装瞬时灭菌,装瓶,封口,即得。