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专利号: 202010438964X
申请人: 青岛科技大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2026-09-09
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种采用碳多孔材料构建抗癌载药系统的构建方法,其特征在于,包括以下步骤:(一)碳多孔材料的合成

S1、称取0.005-20mg3-氨基苯酚,水浴搅拌溶解在有机溶剂中,加入0.5-100mL乙醇和

0.5-100mL去离子水,水浴搅拌溶解并升温至37℃恒定,然后加入0.005-15mL甲醛,以及催化剂,37℃条件下反应10-60min,最后10000r离心1-20min,用去离子水洗涤两次后真空干燥,得前体;

S2、将前体置于通有保护气的管式炉中,200-1200℃碳化3-8h,研磨得碳多孔材料;

(二)碳多孔材料表面改性

S3、碳多孔材料表面的氧化

称取步骤S2获得的碳多孔材料0.1-40mg,加入0.1-20mL过氧化氢,超声处理4h后用去离子水洗涤两次,然后将碳多孔材料真空干燥,获得氧化的碳多孔材料;

S4、碳多孔材料表面的氨基化

将0.1-40mg步骤S3氧化的碳多孔材料分散于0.2-25mL异丙醇中,搅拌加热至50-100℃,再加入0.1-15mL3-氨丙基三乙氧基硅烷,回流冷凝反应6-48h,然后离心并用异丙醇洗涤两次,真空干燥,得氨基化的碳多孔材料;

(三)包载阿霉素与连接小干扰RNA

S5、取步骤S4获得的0.05-15mg氨基化的碳多孔材料分散于0.1-25mL去离子水中,并加入1.0-20μL 3-(2-吡啶二巯基)丙酸N-羟基琥珀酰亚胺酯(SPDP),并在25℃下孵育,0.5-5h后加入0.1-20μL浓度为0.001mol/L的二硫苏糖醇(DTT),反应1-10h后离心洗涤即得连接有SPDP的碳多孔材料;

S6、将连接有SPDP的碳多孔材料重分散于0.1-25mLDEPC水,然后加入0.1-50μL 10-5M的小干扰RNA和0.5-15mg阿霉素,反应0.5-18h,然后离心将沉淀分散在0.1-20mL DEPC水中,得到小干扰RNA包载阿霉素的载药系统。

(四)载药系统表面修饰叶酸FA

S7、取0.05-15mL浓度为10-2mg/L的叶酸,加入0.1mol/L 1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDC)100μL和0.1mol/LN-羟基琥珀酰亚胺(NHS)50μL活化叶酸;

S8、取步骤S6获得的小干扰RNA包载阿霉素的探针0.2-15mL,加入100μL步骤S7活化后的叶酸,反应1-18h,然后离心分散,即得碳多孔材料包载阿霉素并连接siRNA和叶酸FA的载药系统。

2.如权利要求1所述的一种采用碳多孔材料构建抗癌载药系统的构建方法,其特征在于,所述步骤S1中,加入的催化剂为氨水,所述氨水加入的体积和甲醛的体积比为1:1。

3.如权利要求2所述的一种采用碳多孔材料构建抗癌载药系统的方法,其特征在于,所述保护气为氮气。

4.如权利要求3所述的一种采用碳多孔材料构建抗癌载药系统的方法,其特征在于,所述步骤S6中,小干扰RNA包括一条5’端修饰有巯基的RNA链和一条5’端修饰有FAM荧光团的RNA。

5.如权利要求4所述的一种采用碳多孔材料构建抗癌载药系统的方法,其特征在于,所述5’端修饰有巯基的RNA链为SH-GAG UAC CAA GAG AUU CAU ATT。

6.如权利要求5所述的一种采用碳多孔材料构建抗癌载药系统的方法,其特征在于,所述5’端修饰有FAM荧光团的RNA为FAM-UAU GAA UCU CUU GGU ACU CTT。